[发明专利]一种比伐卢定的合成方法

说明书

本发明公开了一种比伐卢定的合成方法，属于多肽药物制备技术领域。比伐卢定的合成方法，包括：步骤（1），活化树脂，采用活化液对树脂进行活化处理获得活化树脂，所述活化液包括二氯甲烷、B‑丁内酯、纳迪克酸酐；步骤（2），Leu‑树脂的合成，采用固相合成法将溶胀后的活化树脂和Fmoc‑Leu合成Leu‑树脂；步骤（3），比伐卢定‑树脂的合成，采用固相合成法合成比伐卢定‑树脂；步骤（4），脱保护，将比伐卢定‑树脂脱保护得到比伐卢定。本发明合成方法合成的比伐卢定得率更高。

技术领域

本发明涉及多肽药物制备技术领域，具体涉及一种比伐卢定的合成方法。

背景技术

生物活性多肽作为药物具有其独特的优点：首先，分子量小，无免疫原性，比较安全；其次，结构相对简单，功能较明确，特异、副作用小；第三，分子小，易于合成，结构易于改造，生产成本低；第四，多肽药物易于从多途径吸收，因此给药途径可多样化（如：口服、喷雾、透皮吸收等）；第五，合成的多肽纯度较高，不存在热源问题。正因为如此，国内外对多肽药物的研究特别重视。

比伐卢定是以水蛭素为基础，人工合成的抗凝血药物，是由20个氨基酸组成的多肽链，分子的重量为2180道尔顿。关于比伐卢定的药理特性的开创性出版物于1989年发表。该药物可以可逆地结合血纤蛋白凝血酶。与普通肝素不同，比伐卢定不需要辅因子来协助其发挥抗凝特性，比伐卢定靶向抑制凝血酶(血小板激动剂)，从而有效降低血小板反应性，这是一种对接受皮冠状动脉介入治疗的患者非常有益的生物学特性。

目前肽合成主要有3种方法：化学法，重组DNA法，酶法。总体上来说，重组DNA技术，由于需要一个长期，昂贵的研究和发展阶段，而且在发酵阶段存在表达效率低和产品提取回收困难等问题。其应用受到很大限制。酶法起步较晚，化学法仍然使用得最多。多肽的化学合成技术无论是液相法还是固相法都已成熟。近几十年来，固相法合成多肽更以其省时、省力、省料、便于计算机控制、便于普及推广。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种纯度高的比伐卢定的合成方法；本发明的另一个目的在于，提供一种取代度高的树脂的活化方法。

为达到上述发明目的，采用如下技术方案。

本发明公开了一种比伐卢定的合成方法，包括：

步骤（1），活化树脂，采用活化液对树脂进行活化处理获得活化树脂，所述活化液包括二氯甲烷、B-丁内酯、纳迪克酸酐；

步骤（2），Leu-树脂的合成，采用固相合成法将溶胀后的活化树脂和Fmoc-Leu合成Leu-树脂；

步骤（3），比伐卢定-树脂的合成，采用固相合成法合成比伐卢定-树脂；

步骤（4），脱保护，将比伐卢定-树脂脱保护得到比伐卢定粗品；

采用含有B-丁内酯、纳迪克酸酐的活化液对树脂进行活化，可以增强树脂的溶胀性，从而更充分地暴露树脂上结合氨基酸的位点，使氨基酸更容易与树脂进行连接，从而增加氨基酸链接的效率，增加比伐卢定得率。

优选地，步骤（1）中，树脂为Wang树脂。

优选地，步骤（1）中，活化液中二氯甲烷、B-丁内酯、纳迪克酸酐的重量比为540-780:30-90:3-45。

优选地，步骤（1）的具体操作包括：

取Wang树脂30-60g加入500-1000g活化液，100-120r/min振荡反应1-4h；反应后过滤出树脂，洗涤烘干后即得活化树脂；其中活化液中二氯甲烷、B-丁内酯、纳迪克酸酐的重量比为540-780:30-90:3-45。