[发明专利]一种桦褐孔菌均一多糖及其制备方法和应用

说明书

本发明公开一种桦褐孔菌均一多糖及其制备方法和应用，本发明采用水提醇沉法、Sevag法、透析获得桦褐孔菌多糖，获得的桦褐孔菌多糖糖含量≥23.26％，糖醛酸含量≥4.92％，蛋白含量≥3.24％，并进一步利用大孔树脂吸附法对桦褐孔菌粗多糖进行纯化，优化吸附工艺后的色素吸附率为83.15％，桦褐孔菌多糖的保留率为78.89％，并获得桦褐孔菌均一多糖，其糖含量提升为≥56.52％，蛋白质含量≦1.37％，糖醛酸含量≦3.76％，该桦褐孔菌均一多糖可通过调节肠道细胞增殖蛋白ki67的表达，改善糖尿病小鼠的糖脂代谢水平，具有显著降低血糖、血脂的生物活性。

技术领域

本发明属于天然产物开发与应用领域，具体涉及一种桦褐孔菌均一多糖及其制备方法和应用。

背景技术

糖尿病是一类代谢疾病，由于胰岛素的分泌不足、胰岛素抵抗(IR,insulinresistance)或两者协同作用而引发的慢性高血糖。高热量饮食、超负荷工作、运动量不足等生活习惯，造成糖尿病发病率呈现逐年增加的趋势。2013年全球范围内共有3.82亿人患有糖尿病，2017年增长至4.25亿，估计到2035年患者人数将增长到5.92亿，中国患者数量位列全球第一，90％的患者为胰岛素抵抗或相对胰岛素缺乏导致的2型糖尿病患者。桦褐孔菌的食用历史可追溯到16世纪，俄罗斯人将桦褐孔菌制为茶饮，用以预防及治疗各种消化道疑难杂症。桦褐孔菌多糖是其中重要的活性成分，被发现可预防及治疗糖尿病，具有降低糖尿病大鼠血糖，改善机体糖、脂代谢的活性，但是作用位点尚不清楚；并且，目前发现具有降血糖活性的桦褐孔菌多糖均为未经纯化的粗多糖，均一性较差，影响其作为保健食品及药品的开发应用。而多糖作为生物大分子，其药理活性与其结构息息相关，而其结构又受其提取、分离、纯化等制备过程的影响。因此，桦褐孔菌的制备、纯化方法及相关技术参数的选择至关重要，其不仅决定了桦褐孔菌多糖的均一性，而且也决定了生物活性的高低。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种旨在通过靶向调节ki67蛋白表达，改善糖尿病糖脂代谢水平，从未实现降低高血糖、高血脂症状的桦褐孔菌均一多糖及其制备方法及应用方向。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种桦褐孔菌均一多糖，所述桦褐孔菌均一多糖含量≥56.52％，糖醛酸含量≦3.76％，蛋白含量≦1.37％；所述桦褐孔菌均一多糖相对分子量3.73×10⁵Da。

进一步地，所述桦褐孔菌均一多糖是由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖组成的α型呋喃糖。

进一步地，所述甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖摩尔质量比为14.19:6.46:3.76:9.15:29.85:20.70:9.07:3.84:2.98。

本发明还提供一种桦褐孔菌均一多糖的制备方法，包括以下步骤：

将桦褐孔菌菌粉与水以料液比1:41混合得到混合液，在75-85℃水浴条件下浸提1.5-3h，过滤，浓缩，在浓缩液中加入无水乙醇，搅拌，醇沉处理，离心，烘干，得到桦褐孔菌粗多糖；所述桦褐孔菌粗多糖糖含量≥23.26％，糖醛酸含量≥4.92％，蛋白含量≥3.24％；

将桦褐孔菌粗多糖加水溶解得到桦褐孔菌粗多糖水溶液，然后与sevag溶液混合，搅拌，静置分层，重复操作，直至得到除蛋白桦褐孔菌粗多糖，然后透析处理，冷冻干燥，得到桦褐孔菌多糖，再与大孔树脂混合，在25-35℃条件下吸附24h进行纯化处理，得到桦褐孔菌均一多糖。

进一步地，所述浓缩是指将过滤后的上清液浓缩至混合液原体积的1/5。

进一步地，所述醇沉处理中无水乙醇添加至混合液原体积的5倍。

进一步地，所述桦褐孔菌粗多糖水溶液与sevag溶液的体积比为1:1。