[发明专利]核酸适配体-药物结合物PTK7-GEMs在制备治疗膀胱癌药物中的应用

说明书

本发明公开了核酸适配体‑药物结合物PTK7‑GEMs在制备治疗膀胱癌药物中的应用。本发明的实验结果发现PTK7‑GEMs通过空间构象与肿瘤细胞膜表面高表达的PTK7蛋白靶向结合，并通过大胞饮入胞方式在胞内磷酸酶作用下释放出吉西他滨，从而在发挥细胞毒性作用，并在三种动物荷瘤模型中显示其显著的抗癌效果。本发明是第一个在膀胱癌组织标本及多种膀胱癌细胞中验证PTK7高表达的研究；同样也是第一个吉西他滨的核酸适配体‑药物结合物（PTK7‑GEMs）通过PTK7蛋白这个靶点高亲和力、特异性将吉西他滨靶向精准运转至肿瘤部位，从而精准发挥抗癌作用的研究。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及核酸适配体-药物结合物PTK7-GEMs在制备治疗膀胱癌药物中的应用。

背景技术

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，在世界范围内，膀胱癌的发病率居恶性肿瘤的第十一位，其形成过程复杂，多种基因参与其中，可分为非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)、肌层浸润性膀胱癌(MIBC)和转移性膀胱癌，其中20～30％的新发病例是MIBC。MIBC的治疗以根治性膀胱切除及盆腔淋巴结清扫为主，术后复发率高达30～45％，5年生存率为45～66％，微转移灶是局部治疗MIBC失败的主要原因之一；约50％新诊断的MIBC患者已发生潜在的局部或远处转移，MIBC仅手术治疗效果有时并不理想，以及部分患者不能通过手术完全切除病灶，临床往往会辅以放、化疗为主的治疗手段。辅助化疗可以使病理分期明确、有转移证据的患者受益于系统化疗，减少局部复发或远处转移复发的可能性。吉西他滨(Gemcitabine，GEM)是一种脱氧胞苷类似物．属嘧啶类，是细胞周期特异性抗肿瘤代谢类药物，主要作用于S期细胞，抑制DNA 合成，并可阻止细胞由Gl期进入S期。

吉西他滨是临床膀胱癌化疗中最常用的一线药物之一，然而，这类基于小分子药物(SMD)的化疗药不能明确区分癌细胞和正常细胞，临床用药常导致严重的副作用和全身毒性。为了解决此类问题，抗体-药物偶联物（ADC）已被批准用于临床治疗，但使用抗体进行药物递送时仍存在挑战，尤其是免疫原性的风险和耐药性的增加事件，此外，合成和化学修饰方面的困难，严格的储存要求也是其主要面对的问题。近年来，靶向癌症治疗尤其是对相应的细胞表面靶点的特异性识别的核酸适配体-药物结合物选择性地将细胞毒性抗癌药物输送到肿瘤组织，由于其易化学修饰，对靶点亲和力高，靶向性强，合成简单，无系统毒副作用，从而受到广泛关注，目前来讲，对于癌症抗肿瘤用药，临床上有效的治疗性适配体-药物结合物的开发远远落后于治疗性抗体-药物，因此，开发膀胱癌靶向性的核酸适配体-吉西他滨结合物对膀胱癌治疗具有重大意义。

蛋白酪氨酸激酶7(PTK7)是受体酪氨酸激酶假激酶家族中高度保守的成员, PTK7蛋白的特异性核酸适配体序列已知， PTK7在结肠癌、乳腺癌、肺癌和食道癌等多种肿瘤细胞中高表达，并且在肿瘤增殖、侵袭，迁移中扮演重要作用. PTK7特异性DNA适配子SGC8是通过一种新的细胞选择过程(CELL-SELEX)筛选出来的，sgc8能有效地膜表面PTK7高表达细胞特异性结合并内化,且评估SGC8对细胞活力无影响，没有细胞毒性。然而关于PTK7在膀胱癌临床标本及膀胱细胞系中是否高表达，暂未有相关研究，同样关于核酸适配体-药物结合物（APDC）是否在膀胱癌组织中有相关特异性靶点，从而具有特意性且能高效传递药物分子，也暂无相关报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明目的是探究核酸适配体-药物结合物PTK7-GEMs对膀胱癌细胞中的细胞毒性及在胞内的智能释放，此外三种动物荷瘤模型验证抗癌效果，旨在对吉西他滨在靶向膀胱癌治疗应用提供一种新的思路。

本发明的技术方案是：

核酸适配体-药物结合物PTK7-GEMs在制备治疗膀胱癌药物中的应用。

优选方案，所述所述膀胱癌包括非肌层浸润性膀胱癌，肌层浸润性膀胱癌，膀胱原位癌，转移性膀胱癌。