[发明专利]纳米荧光标记微球、PGⅠ/PGⅡ单克隆抗体探针以及PGⅠ/PGⅡ检测试剂盒

说明书

本申请涉及生物医药领域，具体公开了一种纳米荧光标记微球、PGⅠ/PGⅡ单克隆抗体探针以及PGⅠ/PGⅡ检测试剂盒。纳米荧光标记微球为由羧基修饰的铕铽配合物，所述纳米荧光标记微球的直径为0.2μm；PGⅠ/PGⅡ单克隆抗体探针由PGⅠ/PGⅡ单克隆抗体负载在上述纳米荧光标记微球而得；PGⅠ/PGⅡ检测试剂盒包括包被有上述PGⅠ/PGⅡ单克隆抗体探针的PGⅠ/PGⅡ检测试剂卡。本申请的纳米荧光标记微球具有较高的荧光强度和较强的荧光寿命，且与抗体的交联物具有较高的结构稳定性，有利于提高PGⅠ/PGⅡ结合的稳定性，有效提高了PGⅠ/PGⅡ检测产品的稳定性。

技术领域

本申请涉及生物医药领域，更具体地说，它涉及一种纳米荧光标记微球、PGⅠ/PGⅡ单克隆抗体探针以及PGⅠ/PGⅡ检测试剂盒。

背景技术

胃蛋白酶原是胃蛋白酶的前体，根据其生化性质和免疫原性将其分成2个亚群，分别为由胃底腺的主细胞和黏液颈细胞分泌的胃蛋白酶原Ⅰ，以及除由胃底腺的主细胞和黏液颈细胞分泌外，也可由贲门腺、胃窦的幽门腺的黏液颈细胞和十二指肠上段产生的胃蛋白酶原Ⅱ。血清胃蛋白酶原水平反映了不同部位胃粘膜的形态和功能。其中，PGⅠ是检测胃泌酸腺细胞功能的指针，胃酸分泌增多PGⅠ升高，分泌减少或胃粘膜腺体萎缩PGⅠ降低；PGⅡ与胃底粘膜病变的相关性较大，其升高与胃底腺管萎缩、胃上皮化生或假幽门腺化生、异型增值有关；PGⅠ/PGⅡ比值和PGⅠ水平对于诊断慢性萎缩性胃炎、糜烂性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡等疾病有很高的价值。

目前，胃蛋白酶原的检测方法较多，有酶联免疫吸附法、化学发光法、时间分辨荧光免疫分析法、乳胶增强免疫比浊法等。在很长一段时间内，针对PGⅠ/PGⅡ检测产品或方法的研究以提高检测灵敏度为主，如公开号为CN110596393A，公开日为2019年12月20日的中国发明专利公开了一种胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ的联合检测方法，其检测胃蛋白酶Ⅰ抗原的灵敏度为0.5ng/mL，线性范围为0～500ng/mL，相关系数R²为0.991；检测胃蛋白酶Ⅱ抗原的灵敏度为0.5ng/mL，线性范围为0～500ng/mL，相关系数R²为0.9881。再如公开号为CN107132359A，公开日为2017年9月5日的中国发明专利公开了一种胃蛋白酶原Ⅰ和胃蛋白酶原Ⅱ检测方法及其试剂盒，其检测胃蛋白酶Ⅰ抗原的灵敏度为0.5ng/mL，线性范围为0～500ng/mL，相关系数R²为0.9994；检测胃蛋白酶Ⅱ抗原的灵敏度为0.5ng/mL，线性范围为0～500ng/mL，相关系数R²为0.9983。

随着研究的不断深入，发明人发现仅以提高灵敏度为研究方向已不能很好满足发展的需要，如何在保证较高灵敏度的前提下，提高PGⅠ/PGⅡ检测产品的稳定性，或者说重复性，是目前亟待解决的另一大问题。

发明内容

为了在保证较高灵敏度的前提下，提高PGⅠ/PGⅡ检测产品的稳定性，有效降低PGⅠ/PGⅡ检测产品检测的变异系数，本申请提供一种纳米荧光标记微球、PGⅠ/PGⅡ单克隆抗体探针以及PGⅠ/PGⅡ检测试剂盒。

近年来，由于稀土元素离子具有特别的电子层结构和丰富的能级数量，使它成为了一个巨大的发光材料宝库，其价值和应用日益受到广泛的关注。稀土配合物发光材料具有发光谱带窄、色纯度高、Stokes位移大、荧光寿命长、物理和化学性质稳定等优良特性，使得稀土配合物在生物医药领域，尤其是作为药物载体得以广泛应用。基于此，发明人在经过大量的分析、试验之后，研究出了一种具有较好稳定性的纳米荧光标记微球，并在此基础上制备出了可应用于检测待测样液PGⅠ/PGⅡ水平的PGⅠ/PGⅡ单克隆抗体探针以及PGⅠ/PGⅡ检测试剂盒。