[发明专利]一种胶原酶修饰的PLGA微球及其制备方法

说明书

本发明涉及病理性纤维化组织内递药效率的改善，具体涉及一种胶原酶修饰的PLGA微球及其制备方法。本发明要解决的技术问题是为药物渗透纤维化组织的胶原屏障提供一种新选择。本发明的技术方案是一种胶原酶修饰的PLGA微球的制备方法，包括如下步骤：将药物微粉与聚乳酸－乙醇酸共聚物(PLGA)共溶解制成微球；然后用胶原酶进行修饰。将胶原酶固定在PLGA微球表面，帮助负载药物的PLGA微球穿过胶原屏障，提高微球内负载药物在组织内的渗透，大大提高了治疗效率。

技术领域

本发明涉及病理性纤维化组织内递药效率的改善，具体涉及一种胶原酶修饰的PLGA微球及其制备方法。

背景技术

纤维化的病理性改变过程往往会伴随着组织内细胞外基质异常增多和过度沉积，不但增加了组织硬度，而且成为阻止药物传递的屏障。破除组织中胶原屏障可以帮助药物在纤维化组织内的渗透，提高药物的生物利用度，提升治疗效率。当前克服胶原屏障的策略主要是基于注射或者微针机械作用的方式为药物传递提供物理通道。然而，进入组织的药物仍旧会受到周围胶原屏障的影响，阻碍其在组织内的扩散。

发明内容

本发明要解决的技术问题是为药物渗透纤维化组织的胶原屏障提供一种新选择。

本发明的技术方案是一种胶原酶修饰的PLGA微球的制备方法，包括如下步骤：

s1、将药物微粉与聚乳酸－乙醇酸共聚物(PLGA)共溶解在有机溶剂中，得到原料溶液；将原料溶液加入到2% PVA溶液中，乳化成悬浮液；将悬浮液加入到0.5% PVA溶液中，室温下搅拌将有机溶剂蒸发完全，过筛，收集硬化后的微球，并用去离子水彻底清洗；所述有机溶剂为二氯甲烷和/或丙酮

s2、将Traut’s试剂加入到浓度为10 mg/mL的胶原酶溶液中，在室温搅拌下反应1h；

s3、向步骤s2的反应液中加入步骤s1得到的微球，得到PLGA微球悬浮液；室温下反应1~12h；离心，PBS溶液洗涤三次，透析，冻干得到表面固定胶原酶的PLGA微球。

其中，步骤s2中，所述胶原酶为I型胶原酶（collagenase I）。

进一步的，步骤s1中，所述2% PVA溶液的体积为原料溶液的5～10倍。

其中，步骤s1中，所述药物微粉占PLGA的重量比为1~20%。

具体的，步骤s1中，所述过筛的筛网为60～100目。

其中，步骤s2中，Traut’s试剂的体积为胶原酶溶液的5倍。

进一步的，步骤s3中，PLGA微球悬浮液的浓度为1 ~10mg/mL。

其中，将步骤s3得到的PLGA微球置于-20℃保存。

具体的，步骤s1中所述的药物为曲安奈德（Triamcinolone acetonide, TA）、5-氟尿嘧啶、阿霉素或肉毒毒素。

本发明还提供了所述方法制备得到的负载有药物的胶原酶修饰的PLGA微球。

本发明的有益效果：胶原酶为胶原的特异性水解酶，可以有效降低组织内胶原沉积，使得细胞外基质的组织和机械力学环境重构。因此，基于固定化酶的思路，将胶原酶固定在PLGA微球表面，帮助负载药物的PLGA微球穿过胶原屏障，提高微球内负载药物在组织内的渗透，大大提高了治疗效率。本发明利用胶原酶对胶原的降解作用，更加有力低破除组织内胶原屏障的阻碍，为药物在组织的扩散提供更多的空间。

附图说明

图1 I型胶原酶修饰的PLGA微球结构示意图；其中PLGA表示聚乳酸－乙醇酸共聚物，collagenase I表示I型胶原酶， Triamcinolone acetonide, TA表示曲安奈德。