[发明专利]一种高活性和高热稳定性的腈水合酶突变体有效
| 申请号： | 202111465494.7 | 申请日： | 2021-12-03 |
| 公开（公告）号： | CN114277022B | 公开（公告）日： | 2023-08-08 |
| 发明（设计）人： | 周哲敏;程中一;印猛;张苇苗;刘中美;崔文璟;周丽;韩来闯;郭军玲 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/88 | 分类号： | C12N9/88;C12N15/60;C12N1/21;C12N15/70;C12P13/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 活性 高热 稳定性 水合 突变体 | ||
【权利要求书】：
1.一种腈水合酶突变体，其特征在于，由α亚基、β亚基以及调控蛋白组成；
所述α亚基的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；
所述β亚基的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；
所述调控蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.编码权利要求1所述腈水合酶突变体的基因。
3.含有权利要求2所述基因的重组载体。
4.表达权利要求1所述腈水合酶突变体的微生物细胞。
5.如权利要求4所述的微生物细胞，其特征在于，所述微生物细胞包括大肠杆菌。
6.如权利要求4或5所述的微生物细胞，其特征在于，所述细胞是以大肠杆菌BL21为宿主，以pET系列质粒为载体。
7.如权利要求6所述的微生物细胞，其特征在于，所述载体为pET-24(+)。
8.一种生产腈水合酶的方法，其特征在于，将权利要求4~7任一所述的微生物细胞接种于培养基中，35~38℃培养至OD600为0.6-0.8时，加入诱导剂IPTG于22~24℃诱导12-16 h。
9.权利要求1所述腈水合酶突变体，或权利要求2所述基因，或权利要求3所述载体，或权利要求4~7任一所述微生物细胞在制备含烟酰胺的产品中的应用。
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