[发明专利]一种α-淀粉酶抑制剂活力的检测方法

说明书

本发明属于生物科技技术领域，具体为一种α‑淀粉酶抑制剂活力的检测方法，包括步骤1：选用麦芽糖制作标准曲线；步骤2：选用酶解过程的生成物衡量抑制剂活力更为合理准确，麦芽糖与3,5‑二硝基水杨酸(DNS)在高温下发生显色反应，颜色深浅(A540)与麦芽糖浓度存在对应关系；步骤3：将淀粉酶活力值统一折算到100IU后再计算抑制剂活力值，其设计合理，将α‑淀粉酶实际活力统一折算到100IU后，再计算抑制剂活力更为合理，保证了检测结果的准确性。

技术领域

本发明涉及生物科技技术领域，具体为一种α-淀粉酶抑制剂活力的检测方法。

背景技术

现有的淀粉酶抑制剂活力的检测方法在使用的过程中存在着一下不足：

1、标准曲线的建立：采用葡糖糖标准曲线作为检测判定依据，由于α-淀粉酶酶解淀粉的直接产物主要为麦芽糖、异麦芽糖、麦芽寡糖等，因此采用葡萄糖标准曲线作为检测依据存在不合理性，结果存在偏差；

2、显色方案的选取：利用淀粉溶液在碘-碘化钾作用下显蓝色，在一定浓度范围内，660nm处的吸光值和淀粉的量呈线性关系的特点，再根据加入α-淀粉酶抑制剂前后α-淀粉酶分解淀粉量的差值，计算淀粉酶抑制剂的活力。此方法的不合理之处是如果待测样品中含有淀粉会影响活力测定结果，而且淀粉含量越高，所测得的活力相应就越高。而本方法采用的原理是：麦芽糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)在高温下发生显色反应，颜色深浅(A540)与麦芽糖浓度存在对应关系，因此按生成物的量衡量抑制剂活力更为合理准确。

3、淀粉酶活力的标准限定：

作为淀粉酶抑制剂，其所抑制的目标淀粉酶活力值对抑制活力的测定存在很大影响，如所用的α-淀粉酶活力较低则测试所得的抑制剂活力会很高，因此规范所要抑制的目标α-淀粉酶的活力对检测结果的规范性很有必要。

α-淀粉酶抑制剂活力(IU)定义为：在37℃/pH6.9下，在α-淀粉酶催化淀粉水解的反应中，当反应体系的α-淀粉酶活力为100IU时，1min内抑制1μg麦芽糖生成所需α-淀粉酶抑制剂的量。

因此，根据将α-淀粉酶实际活力统一折算到100IU后，再计算抑制剂活力更为合理。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施方式的一些方面以及简要介绍一些较佳实施方式。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

鉴于现有淀粉酶抑制剂活力的检测方法中存在的问题，提出了本发明。

因此，本发明的目的是提供一种α-淀粉酶抑制剂活力的检测方法，能够实现将α-淀粉酶实际活力统一折算到100IU后，再计算抑制剂活力更为合理，保证了检测结果的准确性。

为解决上述技术问题，根据本发明的一个方面，本发明提供了如下技术方案：

一种α-淀粉酶抑制剂活力的检测方法，其包括如下步骤：

步骤1：选用麦芽糖制作标准曲线；

步骤2：选用酶解过程的生成物衡量抑制剂活力更为合理准确，麦芽糖与3,5-二硝基水杨酸(DNS)在高温下发生显色反应，颜色深浅(A540)与麦芽糖浓度存在对应关系；

步骤3：将淀粉酶活力值统一折算到100IU后再计算抑制剂活力值。

作为本发明所述的一种α-淀粉酶抑制剂活力的检测方法的一种优选方案，其中：步骤1具体包容如下步骤：

(1)取7只试管编号，分别加入麦芽糖标准溶液(1mg/mL)0，0.15，0.45，0.75，1.05，1.35，1.5mL，然后用去离子水将各试管中液体体积补足至1.5mL；