[发明专利]一种人参多肽的制备方法

说明书

本发明涉及多肽制备技术领域，具体涉及一种人参多肽的制备方法，所述人参多肽的制备方法，包括如下步骤：(1)将人参粉碎后加入乙醇提取，离心、过滤，得到滤渣A和滤液A；(2)将滤渣A在水中进行酶解，过滤，得到滤液B；(3)将滤液A和滤液B合并，过HPD‑400大孔树脂柱，分别用水、10％乙醇、20％乙醇和30％乙醇洗脱，收集10％乙醇、20％乙醇和30％乙醇洗脱液，干燥后即得。本发明具有收率和纯度高、抗氧化活性高的优点。

技术领域

本发明涉及多肽制备技术领域，具体涉及一种人参多肽的制备方法。

背景技术

人参(学名：Panax ginseng C.A.Meyer)是五加科、人参属多年生草本植物。人参的肉质根为强壮滋补药，适用于调整血压、恢复心脏功能、神经衰弱及身体虚弱等症，也有祛痰、健胃、利尿、兴奋等功效。《神农本草经》最早描述了人参的药理作用：主补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，明目，开心益智。人参营养成分主要有氨基酸、蛋白质、糖类、挥发油、核苷酸、黄酮、人参皂苷、有机酸、维生素、甾醇类和无机元素。现代医学研究表明，人参皂苷作为主要活性成分，广泛参与中枢神经系统、应激与性功能以及受体和信号传导功能。

近年来研究表明人参蛋白具有多种生物学活性。李霞等人(“人参水溶性蛋白活性研究进展”，中国实用医药，5(27)，2010年)报道了人参蛋白增强免疫的作用，如促进某些细胞增殖、抑制肿瘤细胞增殖、抗病毒和抗细菌等功能。徐云凤等人(“人参蛋白对小鼠的耐缺氧及抗氧化作用”，食品科技，37(03)，2012年)报道了人参蛋白对小鼠耐缺氧能力具有显著增强作用，对D-半乳糖造模小鼠有一定的抗氧化作用。李红艳等人(“人参蛋白对β淀粉样蛋白1-40和H2O2损伤神经元的保护作用及其机制”，吉林大学学报(医学版)，39(06)，2013年)报道了人参蛋白神经保护的作用，其作用机制与减少NOS活性、降低NO水平、抑制神经元凋亡有关。

在人参蛋白研究基础上，进一步发现人参多肽的生物学作用。王本祥等人(“人参多肽降血糖作用”，药学学报，25(6)，1990年)报道了人参多肽具有降低正常血糖和肝糖原，但对总血脂无明显影响，对肾上腺、四氧嘧啶及葡萄糖所引起的高血糖均有抑制作用，并能增强肾上腺素对肝糖原的分解的功效。Mara Colzani等人(“The secrets of Orientalpanacea:Panax ginseng”,Journal of Proteomics，Volume 130,1January 2016,Pages150-159)报道了用胃蛋白酶和肠酶连续水解来模拟蛋白质的生理酶促消化，证实了人参蛋白质组中的多种活性肽的生物学活性。李红艳等人(“人参总蛋白的酶解及氨基酸含量测定”，中国现代中药，18(01)，2016年)报道了人参蛋白采用胃蛋白酶、胰蛋白酶及双酶(胃蛋白酶与胰蛋白酶联合)酶解后，转变为多肽及少量氨基酸，且氨基酸种类变化不大，含量明显减少。结论是人参蛋白在体内发挥作用的最终活性物质是多肽。

多肽通常由10～100个氨基酸分子脱水缩合而成，其分子量介于1.1KDa～11KDa。近期科学家认为人参蛋白主要是以多肽的形式吸收。多肽作为基础营养物质，相比于蛋白质和氨基酸它具有容易吸收和生物利用度高的特点。因此，蛋白的吸收率低成为主要限制因素，单纯通过食物摄取蛋白质的方法，已经不能满足人体对蛋白质的需求。

中国专利申请CN108034685A公开了一种人参多肽的制备方法，包括以下步骤：将干燥的人参切片，得到人参片，将人参片放入到加热罐中并在加热罐内加入蒸馏水，人参片与蒸馏水的比例为1:5-10，加热至121℃，并维持1～2小时，得到料液Ⅰ，所得的料液Ⅰ冷却至常温，用200目滤布过滤去除残渣，得到料液Ⅱ，将料液Ⅱ的pH调整至4.0～9.0，并加入复合酶，维持温度在50～60℃，持续搅拌，酶解2～6小时，再加热至80～90℃，灭酶5～10分钟；得到料液Ⅲ；所得的料液Ⅲ过滤去除残渣后，再经过膜过滤、浓缩、喷雾干燥，得到人参多肽成品。本发明采用复合酶酶解人参的方法，提取收率在30％左右，酶解纯度高，极大地减少对环境的污染并简化操作工序。虽然该发明采用复合酶的方式，提高了酶解的收率和纯度，但是制备得到的人参多肽的抗氧化活性有待提高。