[发明专利]CL7蛋白质、高活性重组TET酶CL7-NgTET1、其原核表达载体及应用

权利要求书

1.一种CL7蛋白质，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。

2.权利要求1所述的CL7蛋白质在提高TET酶NgTET1的活性中的应用。

3.一种高活性重组TET酶CL7-NgTET1，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示。

4.权利要求3所述的高活性重组TET酶CL7-NgTET1的原核表达载体，其特征在于其结构为：pET28A-N6H-MBP-CL7-NgTET1，其中N6H为pET28A 质粒自带的N端His标签，MBP编码SEQID NO：3所示的MBP融合蛋白。

5.根据权利要求4所述的高活性重组TET酶CL7-NgTET1的原核表达载体，其特征在于：N6H与MBP之间通过linker连接，所述linker的序列具体为AGCAGCGGCTTTGGTGCCGCGCGGCAGCCAT。

6.根据权利要求4所述的高活性重组TET酶CL7-NgTET1的原核表达载体，其特征在于：MBP与CL7-NgTET1之间设有TEV蛋白酶位点，其核酸序列为ATCTGTATTTTCAGGGT 。

7.权利要求3所述的高活性重组TET酶CL7-NgTET1在酶转化法检测DNA甲基化中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于其步骤包括：

（1）在待测样本中加入TET酶氧化缓冲液和高活性重组TET酶CL7-NgTET1；

（2）加入蛋白酶K终止反应，回收DNA；

（3）DNA甲基化检测分析。