[发明专利]一种基于生物效应的心可舒片质量控制方法

说明书

本发明提供了一种基于生物效应的心可舒片质量控制方法，具体包括：心可舒片样品甲醇提取物的制备；采用斑马鱼节间血管生成障碍模型对心可舒片样品甲醇提取物进行生物效应检测，用药浓度以心可舒片样品浓度为85μg/ml为标准；采用斑马鱼高血脂症模型对可舒片样品甲醇提取物进行生物效应检测，用药浓度以心可舒片样品浓度为680μg/ml为标准；斑马鱼节间血管生成障碍模型中斑马鱼节间血管长度达到2184μm以上，斑马鱼高血脂症模型中降脂率达到43％以上，同时达到所述两个指标数值时判定心可舒片样品为合格样品，该方法有效减少对心可舒片样品生物活性检测出现误判的现象，实现了基于生物效应的心可舒片质量控制。

技术领域

本发明具体涉及建立一种基于生物效应的心可舒片质量控制方法，属于中成药质量控制技术领域。

背景技术

“心可舒片”由丹参、葛根、三七、山楂、木香组成，具有活血化瘀、行气止痛的功效，常用于气滞血瘀引起的胸闷、心悸、头晕、头痛、颈项疼痛；冠心病心绞痛、高血脂、高血压、心律失常见上述证候者。《中国药典》(2020年版一部)(以下简称药典)现行质量标准包括性状、鉴别、检查、特征图谱、含量测定等项目。鉴别项主要包括三七和金丝桃苷鉴别方法。特征图谱包含丹参素钠、原儿茶醛、3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、葛根素-7-木糖苷、大豆苷、丹酚酸B等8个特征峰。含量测定以丹酚酸B，丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B总量，木香烃内酯，去氢木香内酯的含量为指标。由上可见，药典质量控制体系基本涵盖了心可舒片处方全部药味的控制，但是该体系涉及的实验数量繁多且复杂，质量控制指标与临床功效相关性差，且只检测了少数几个化合物，不能准确评价心可舒片的整体质量。近年来，基于生物效应的质量控制方法受到广泛关注，为中药质量控制提供了新思路。生物效应检测是利用药物对试验系所产生的生物效应，以生物统计为工具，从与药物临床功能主治相关的角度出发，运用特定的实验设计，测定药物有效性、安全性的一种方法。基于生物效应的质量控制方法能够实现不唯成分论，以与临床药效相关的生物效应水平控制中成药质量。尤其对组成药味复杂、有效成分不明确的中成药，更能凸显其整体性与优越性。

斑马鱼遗传背景清晰，与人类基因同源性高达87％，心、肝、肾等脏器生理结构和功能与人类高度相似，具有广泛的P450酶，拥有与人类相似的多条药物代谢途径，是国际认可的模式生物，其在早期药物活性与安全性评价中的应用受到国际顶尖杂志、药物审评管理部门、著名毒理学家、大型制药企业等的持续重点关注。以斑马鱼为模型的实验既具有体外实验快速、高效、成分低和用药量小的优势，又具有哺乳类动物实验预测性强、可比度高和可观察多个器官等优点。研究表明，斑马鱼幼鱼比HiPSC心肌细胞系统能够更可靠地预测心脏毒性，且斑马鱼与犬的预测性相似，数十种基于斑马鱼表型筛选的创新药物已经在开展临床研究。目前，斑马鱼模型已经在中药活性评价、药效物质筛选、作用机制研究等方面得到广泛应用。

中国文献《斑马鱼高血脂模型在山青之片质量控制中的应用研究》(郭殿宾、周娟等，中国药品标准2013年第14卷第4期)，该文献公开了利用斑马鱼高血脂模型对山青之片降血脂作用进行生物活性评价和质量稳定性检测。中国文献《山青之片辅助降血脂作用临床观察》(冯飞玉、唐礼可等，浙江中西医结合杂质2009年第19卷第9期)公开了山青之片具有降血脂的作用，山青之片主要含有赤芍提取物和党参提取物，而赤芍和党参均具有一定的降血脂作用。由于山青之片功能单一、成分组成相对简单，可以仅利用单个生物效应功能指标进行质量稳定性检测；但是中成药治疗疾病具有多成分、多靶点和多途径的特色与优势，多数中成药具有组方配伍药味多，成分组成复杂，功能主治广泛等特点，能够通过多种不同药理作用协同起效，仅利用单个生物效应功能指标进行质量控制不可行，易出现错误评估。

心可舒片处方含有丹参、葛根、木香、三七、山楂；心可舒片具有扩张冠脉，改善心肌缺血，活血化瘀，改善心脏微循环，增加冠脉血流量，增强心肌细胞线粒体及三磷酸腺苷(ATP)酶活性等多种生物活性。现有技术中对处方复杂且具有多种功能主治的中药，利用生物效应进行质量控制还未见报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种基于生物效应的心可舒片质量控制方法。