[发明专利]反相液相色谱法测定消毒产品中苯扎氯铵同系物含量的方法

权利要求书

1.反相液相色谱法测定消毒产品中苯扎氯铵同系物含量的方法，其特征是它包括以下步骤：

步骤一，准备检测仪器：检测仪器包括安捷伦1200液相色谱仪、液相色谱柱，超声波提取仪，0.45 μm聚砜醚水相滤膜和电子分析天平，液相色谱仪配有配二极管阵列检测器；

步骤二，准备检测试剂：检测试剂包括乙腈，三乙胺、冰醋酸、乙酸铵，纯度≥98%的十二烷基二甲基苄基氯化铵，纯度≥98%的十四烷基二甲基苄基氯化铵，纯度≥98%的十六烷基二甲基苄基氯化铵，电阻率为18.2 MΩ.cm的超纯水；

步骤三，配制标准溶液：采用电子分析天平准确称取苯扎氯铵的三种组分对照品十二烷基二甲基苄基氯化铵、十四烷基二甲基苄基氯化铵、十六烷基二甲基苄基氯化铵以纯品计各0.02 g，精确至0.0001 g，用水溶解转移至10 mL容量瓶中，定容至刻度并摇匀，此溶液苯扎氯铵三种组分浓度都为2 mg/mL，置于4℃密封避光保存，临用时，移取上述标准贮备液适量以水稀释配制系列标准工作溶液，浓度分别为：5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、100 mg/L、500 mg/L；

步骤四，样品的前处理：采用电子分析天平准确称取消毒产品1 g于10 mL容量瓶中加入水稀释至刻度，摇匀，采用超声波提取仪超声提取5 min后，静置，消毒产品的重量精确至0.0001g，过0.45 µm聚砜醚水相滤膜后，上机测试，由于消毒产品中苯扎氯铵的含量从常量的到微量的都有，取样量按照微量的进行操作，常量的可以减小取样量，也可以进行稀释处理后上机测定；

步骤五，采用液相色谱对测定后的溶液进行分析，选取流动相，流动相为乙腈-0.5 g/L乙酸铵缓冲溶液，乙腈-0.5 g/L乙酸铵缓冲溶液含0.1%三乙胺，冰醋酸调pH=5.0，在液相色谱柱加入流动相后对通过DAD检测器对液相色谱柱的样品进行检测，再进行色谱分析，最后等度淋洗进行色谱分离。

2.根据权利要求1所述的反相液相色谱法测定消毒产品中苯扎氯铵同系物含量的方法，其特征是步骤一和步骤五中的液相色谱柱为沃特世BEH C₁₈色谱柱，Agilent XDB-C₁₈色谱柱或C₁₈ 色谱柱，其中沃特世BEH C₁₈色谱柱尺寸为250mm×4.6mm，5μm；Agilent XDB-C₁₈ 色谱柱的尺寸为250mm×4.6mm，5μm；C₁₈ 色谱柱的尺寸为250mm×4.6mm，5μm。

3.根据权利要求1所述的反相液相色谱法测定消毒产品中苯扎氯铵同系物含量的方法，其特征是步骤一中的电子分析天平为CP225D型电子分析天平。

4.根据权利要求1所述的反相液相色谱法测定消毒产品中苯扎氯铵同系物含量的方法，其特征是步骤二中十二烷基二甲基苄基氯化铵的CAS号为139-07-1；十四烷基二甲基苄基氯化铵的CAS号为139-08-2；十六烷基二甲基苄基氯化铵的CAS号为122-18-9。

5.根据权利要求1所述的反相液相色谱法测定消毒产品中苯扎氯铵同系物含量的方法，其特征是步骤五中DAD检测器的波长：262nm，柱温为40 ℃，流速：1.0 mL/min，等度洗脱，进样量：20 μL。

6.根据权利要求1所述的反相液相色谱法测定消毒产品中苯扎氯铵同系物含量的方法，其特征是步骤五中乙腈-0.5 g/L乙酸铵缓冲溶液配制过程如下称取0.5 g乙酸铵溶解于200 mL水中，加入1 mL三乙胺，转移至1000 mL容量瓶中，定容至刻度，用冰醋酸调节pH=5.0，过0.45 μm水相滤膜，体积比70:30。