[发明专利]一种负载帕瑞昔布、白介素-4和牛血清白蛋白用于骨关节炎治疗的双层微球及其制备方法

说明书

本发明涉及一种负载帕瑞昔布、白介素‑4和牛血清白蛋白用于骨关节炎治疗的双层微球及其制备方法，属于药物载体研究技术领域，本发明采用两次复乳溶剂挥发法制备载理化性质不同的药物，目的在于解决目前临床上制约骨关节炎药物治疗的瓶颈问题或亟待满足的患者需求——骨关节炎发作期间炎症反应引起疼痛与行动不便等问题、关节腔注射面临需要反复注射引起感染问题、口服非甾体抗炎药引起的心脏毒性与胃肠道反应、骨关节炎的长期慢性性质导致的患者用药依存性差问题。

技术领域

本发明涉及一种负载帕瑞昔布、白介素-4和牛血清白蛋白用于骨关节炎治疗的双层微球及其制备方法，属于药物载体研究技术领域。

背景技术

针对骨关节炎的治疗，选择性COX-2抑制剂的NSAIDs药物（如塞来昔布、依托考昔等）目前在临床上广泛运用，但是消化道不良反应发生率仍较高，同时口服NSAIDs药物的心血管风险仍不能低估，且长期口服药物患者依从性较差。由于关节炎发病部位的特殊性，对于那些非药物干预或缓解症状药物无效的患者，建议进行关节内注射，以尝试更直接地针对潜在的病理生理过程，但直接关节腔注射单剂量药物作用持续时间有限，因此，常需要重复应用以维持较长时间的疼痛缓解，这又将导致感染，肌肉无力和激素失衡等不良反应。

具有长期可控的释放特性的药物载体——微球，可减少给药次数、减少给药风险，提高患者依从性。微球作为一种药物可控释放体系载体，其常用的载体材料如聚酯、聚酰胺、聚乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA）等已被广泛用于开发药物递送系统，且具有良好的生物降解性，降解时间和药物释放速率应能可根据需求进行调控，且降解后产物对细胞无毒害作用，具有极高的安全性。由于骨关节炎发病及其他临床疾病的病理特征，临床上在采取药物治疗措施的时候常常采用联合给药的方式，以期解决患者多方面的痛苦，使患者及时得到有效的治疗。以骨关节炎为例，常需要首先给予患者快速抗炎药物，如高效高选择性的非甾体抗炎药物，与此同时，为达到更好的长期预后效果，需同时给予软骨修复药物，提高患者生存质量。两种药物常常具有不同的物理性质，如溶解度的差异，微球作为水溶性、脂溶性药物的良好载体，对于同时携带两种性质不同的药物具有巨大的潜能。

发明内容

本发明的目的在于提供一种负载帕瑞昔布（PXB）、白介素-4和牛血清白蛋白用于骨关节炎治疗的双层微球及其制备方法，满足在微球中同时携带性质不同的药物的需求。滑膜炎症引起OA的许多体征和症状，包括疼痛和肿胀。临床上已经使用的小分子高效抗炎镇痛药物帕瑞昔布可以与IL-4一起在单个系统中共同给药，以增强治疗效果。当用于关节内（IA）注射时，由于帕瑞昔布的快速释放，该组合可引起炎症的快速沉降和疼痛的减轻，随后关节软骨的再生以及IL-4的持续释放。本发明为长效缓释制剂，选用了内外两种不同的载体材料，制备出负载帕瑞昔布、白介素-4和牛血清白蛋白（牛血清白蛋白为保护剂）的双层微球，使得非甾体抗炎药帕瑞昔布（PXB）与巨噬细胞极化因子白介素-4（IL-4）联用，同时逐级、持续、稳定地释放出药物，解决膝关节炎注射抗炎药物所带来的副作用，提高治疗效果及患者的依从性。本发明的技术方案如下：

一种负载帕瑞昔布、白介素-4和牛血清白蛋白用于骨关节炎治疗的双层微球的制备方法，步骤如下：

（1）取白介素-4（IL-4）溶于含模型蛋白牛血清白蛋白（BSA）的PBS溶液作为内水相A；

（2）称取内层载体材料酯封端聚乳酸乙醇酸共聚物OH-PLGA75/25-COOR溶于二氯甲烷中，形成浓度100mg/mL的载体材料溶液作为油相A，配制1%（w/v）的聚乙烯醇（PVA）作为外水相；优选的，所述聚乳酸乙醇酸共聚物OH-PLGA75/25-COOR中LA:GA为75：25，分子量为75000。

（3）将内水相A逐滴加入溶有载体材料的油相A中，经高速剪切机以8000rpm的速度剪切2min后，将形成的W1/O1型乳液，然后再将W1/O1型乳液逐滴加入1%（w/v）的PVA中，经匀浆机以8000rpm的速度剪切2min，得到W1-O1-W2型复乳；