[发明专利]沙眼衣原体/淋球菌/生殖支原体抗原联合检测试剂盒及其制备方法

说明书

沙眼衣原体/淋球菌/生殖支原体抗原联合检测试剂盒及其制备方法，涉及检测试剂盒领域；包括检测卡，所述检测卡包括底板、加样板、乳胶结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，所述加样板、乳胶结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸依次首尾连接并固定于所述底板上，所述乳胶结合垫固定有第一乳胶微球标记的沙眼衣原体/淋球菌/生殖支原体特异性抗体和第二乳胶微球标记的链霉亲和素，所述硝酸纤维素膜设有包被沙眼衣原体/淋球菌/生殖支原体抗体的检测线和包被生物素‑BSA的质控线。本发明的检测试剂盒，仅需一次取样及样本处理过程的条件下，同时完成沙眼衣原体/淋球菌/生殖支原体的抗原检测，效率高，且特异性强，灵敏度高。

技术领域

本发明属于检测试剂盒领域，具体涉及沙眼衣原体/淋球菌/生殖支原体抗原联合检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

沙眼衣原体是一种细胞内寄生的微生物，可侵犯眼、生殖道和其它脏器，是一种常见的性传播疾病，除引起泌尿生殖道感染外，还是增加艾滋病病毒(HIV)感染的危险因素之一。

淋病奈瑟菌(Nei sseria gonorrhoeae.NG)俗称淋球菌，是人体寄生微生物，形态与脑膜炎球菌类似,主要寄居在急性尿道炎和阴道炎的脓性分泌物的白细胞中，是淋病的病原菌，主要通过性传播，只感染人类，男性常引起急性尿道炎，女性则一般表现为无症状感染，但病菌可向深部组织播散导致宫颈炎或不孕等严重后果。

生殖支原体是所有支原体中基因组最小的一种，最简单的原核生物，缺乏细胞壁，仅有一层细胞膜。生殖支原体是近年来确认的性传播疾病(STD)病原体之一，在男性引起非淋球菌性尿道炎(NGU)，在女姓导致宫颈炎、子宫内膜炎及盆腔炎等，如不治疗可致异位妊娠、不孕等不良结局。

沙眼衣原体感染的实验室诊断方法主要有三类：(1)以细胞培养为代表的细胞生物学方法；(2)以直接荧光抗体测定(DFA)法、酶免疫法(EIA)和胶体金法为代表的免疫学方法；(3)以核酸探针检测法和核酸扩增技术(PCR,LCR)为代表的分子生物学检测方法。细胞培养法自上世纪70年代以来一直被作为诊断CT感染的“金标准”，是唯一能检测衣原体活体的方法，具有高度特异性，但敏感性较低，且受实验条件、费用等影响，目前只局限于实验室研究，还未被用作常规的诊断方法。直接荧光抗体测定(DFA)法可以检测衣原体各种类型的标本。这种技术敏感、特异、快速，是一种操作性和实用性都很强的诊断技木平。但此项技术操作要求高。且长时间观察荧光显微镜，容易引起视觉疲劳，不适于大规模的临床筛查。较传统的检测方法敏感性显著提高，是迄今为止诊断和筛查衣原体感染最敏感的方法，但其对技术条件和实验室条件要求高，受到的影响因素很多，如临床标本容易受非衣原体、非淋球菌及污染等影响，容易出现假阳性和假阴性结果，特异性降低。

淋球菌诊断主要依赖于实验室对淋球菌的检测：(1)涂片法；(2)培养基培养法；(3)聚合酶链反应技术。涂片检查法：取泌尿生殖道脓性分泌物涂片革兰染色，镜下可见大量多形核白细胞，白细胞内、外可见数量不等的革兰阴性双球菌。本法对有大量脓性分泌物的单纯性急性淋菌性前尿道炎，尤其是男性淋病性尿道炎，其敏感性可达95％，对慢性淋病患者敏感性较低，女性患者容易出现假阳性。培养检查法：培养法被认为是诊断淋病奈瑟菌的“金标准”，但其缺点是费时、操作繁琐。淋病奈瑟菌培养对症状很轻或无症状的女性和男性患者敏感性均高，因此培养法是目前世界卫生组织推荐的筛查和诊断淋病患者的主要实验室方法。聚合酶链反应技术：PCR(聚合酶链反应)是1985年建立起来的一种体外DNA扩增试验。其基本原理是酶促DNA合成反应，即在模板DNA、引物和脱氧核糖核酸存在下，在DNA聚合酶的作用下，使DNA链扩增延伸。由于试验的敏感性和特异性高，对标本采集的要求远不如培养那么严格，使它在医学领域得到广泛应用。其缺点是对技术条件和实验室条件要求高。