[发明专利]基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白、疫苗及其制备方法与用途有效
| 申请号： | 202111498463.1 | 申请日： | 2021-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN114369170B | 公开（公告）日： | 2022-09-23 |
| 发明（设计）人： | 张磊;张研宇;解源;曹庆泽;辛乐乐;张淑嫱 | 申请（专利权）人： | 陕西师范大学 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/70;C12N1/21;A61K31/4188;A61K38/16;A61K47/64;A61P35/00;C12R1/19 |
| 代理公司： | 西安智邦专利商标代理有限公司 61211 | 代理人： | 汪海艳 |
| 地址： | 710062 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 靶向 生长因子 神经 胶质 细胞 治疗 融合 蛋白 疫苗 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白，其特征在于：为由来自于大肠杆菌的外源蛋白TRX和多效生长因子PTN融合形成的融合蛋白TRX-PTN；
由pET21a原核载体表达系统表达，利用融合蛋白C端的His标签进行镍柱纯化；
氨基酸序列如下：
2.一种基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性疫苗，其特征在于：含有权利要求1所述基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白。
3.一种基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白或疫苗在制备治疗神经胶质母细胞瘤药品方面的应用，所述基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白为权利要求1所述融合蛋白，所述基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性疫苗为权利要求2所述疫苗。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白或疫苗在制备促进神经胶质母细胞瘤血管正常化药品中的应用。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白或疫苗在制备减低神经胶质母细胞瘤肿瘤血管密度药品中的应用。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白或疫苗在制备抑制神经胶质母细胞瘤血管生成药品中的应用。
7.一种基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白或疫苗与替莫唑胺联用在制备治疗神经胶质母细胞瘤药品方面的应用；所述基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白为权利要求1所述融合蛋白，所述基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性疫苗为权利要求2所述疫苗。
8.一种权利要求1所述基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1、重组表达载体的制备；
步骤1.1、合成融合蛋白TRX-PTN基因序列；
步骤1.2、制备重组表达载体pET21a-TRX-PTN；
步骤2、制备重组菌pET21a-TRX-PTN/Rosseta；
将步骤1制备的pET21a-TRX-PTN重组载体导入大肠杆菌Rosseta(DE3)中，得到重组菌pET21a-TRX-PTN/Rosseta；
步骤3、制备融合蛋白TRX-PTN；
步骤3.1、通过培养得到pET21a-TRX-PTN/Rosseta菌体；
步骤3.2、将pET21a-TRX-PTN/Rosseta菌体超声裂解得到融合蛋白TRX-PTN的上清液；
步骤3.3、将融合蛋白TRX-PTN的上清液利用镍柱纯化，后处理得到融合蛋白TRX-PTN。
9.一种权利要求2所述基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1、利用权利要求8所述的方法制备基于靶向多效生长因子的神经胶质母细胞瘤治疗性融合蛋白；
步骤2、制备疫苗制剂；
以Montanide ISA720为溶剂，每毫升溶剂加入1mg融合蛋白。
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