[发明专利]复合型生物阻断剂及其制备方法和试剂条在审
申请号: | 202111508326.1 | 申请日: | 2021-12-10 |
公开(公告)号: | CN114324854A | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 许行尚;杰弗瑞·陈;朱道云;熊凯 | 申请(专利权)人: | 南京岚煜生物科技有限公司;南京岚轩生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/543 | 分类号: | G01N33/543;G01N33/558;G01N33/533 |
代理公司: | 南京北辰联和知识产权代理有限公司 32350 | 代理人: | 陆中丹 |
地址: | 210000 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 复合型 生物 阻断剂 及其 制备 方法 试剂 | ||
1.一种用于免疫层析检测的复合型生物阻断剂,其特征在于,包括有阻断剂缓冲液,所述阻断剂缓冲液中稀释有鼠单克隆抗体IgG-1、鼠单克隆抗体IgG-2、羊抗人IgM/RF多克隆抗体和兔多抗IgG;在所述阻断剂缓冲液还添加有BSA;
其中,所述阻断剂缓冲液为三羟甲基氨基甲烷-盐酸Tris-HCl缓冲液或磷酸盐PBS缓冲液。
2.根据权利要求1所述的用于免疫层析检测的复合型生物阻断剂,其特征在于,所述阻断剂缓冲液为10mM三羟甲基氨基甲烷-盐酸Tris-HCl缓冲液或10mM磷酸盐PBS缓冲液。
3.根据权利要求2所述的用于免疫层析检测的复合型生物阻断剂,其特征在于,所述阻断剂缓冲液的pH为7.4±0.2。
4.根据权利要求1所述的用于免疫层析检测的复合型生物阻断剂,其特征在于,所述鼠单克隆抗体IgG-1、鼠单克隆抗体IgG-2、羊抗人IgM/RF多克隆抗体和兔多抗IgG分别用所述阻断剂缓冲液稀释到10mg/mL、10mg/mL、2mg/mL、2mg/mL。
5.权利要求1-4任一项所述的用于免疫层析检测的复合型生物阻断剂,所述阻断剂缓冲液添加BSA至10mg/mL。
6.权利要求5所述的用于免疫层析检测的复合型生物阻断剂,在所述阻断剂缓冲液还添加有Proclin 300。
7.一种用于免疫层析检测的复合型生物阻断剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:配制阻断剂缓冲液,所述阻断剂缓冲液采用10mM三羟甲基氨基甲烷-盐酸Tris-HCl缓冲液或10mM磷酸盐PBS缓冲液,所述阻断剂缓冲液pH为7.4±0.2;
S2:将鼠单克隆抗体IgG-1、鼠单克隆抗体IgG-2、羊抗人IgM/RF多克隆抗体和兔多抗IgG分别用所述步骤S1中的阻断剂缓冲液稀释到10mg/mL、10mg/mL、2mg/mL、2mg/mL;
S3:向所述步骤S2的阻断剂缓冲液中添加BSA至10mg/mL;
S4:向所述步骤S3的阻断剂缓冲液中添加Proclin 300,得复合型生物阻断剂。
8.一种荧光免疫检测试剂条,其特征在于,包括有样品垫、结合垫、包被好的硝酸纤维素膜和吸水纸四个部分;其中,所述样品垫采用样品垫处理液进行处理,样品垫处理液包括pH为8~10的缓冲液、表面活性剂、海藻糖、红细胞单抗和权利要求1-5中任一项所述的复合型生物阻断剂,所述复合型生物阻断剂按照0.5%的体积比加入到所述样本处理液中。
9.根据权利要求8所述的荧光免疫检测试剂条,其特征在于,所述结合垫的制备方法为:(1)荧光微球与EDC在磷酸盐缓冲液中进行活化处理;(2)将检测抗体一和鸡IgY加入上述荧光微球溶液中进行反应;(3)偶联好的微球-抗体复合物进行封闭反应,经离心后制得免疫荧光微球标记物;(4)将调配好浓度的免疫荧光微球标记物溶液包被到玻璃纤维上,烘干,制得结合垫。
10.根据权利要求8所述的荧光免疫检测试剂条,其特征在于,所述硝酸纤维素膜的制备方法为:检测抗体二配制T线溶液,羊抗鸡IgY配制C线溶液,然后包被在硝酸纤维素膜上的T检测线、C质控线区域,烘干。
11.根据权利要求8所述的荧光免疫检测试剂条,其特征在于,该试剂条的制备方法为:从加样端开始依次为样品垫、结合垫、包被好的硝酸纤维素膜和吸水纸四个部分,依次粘贴在底板上,然后切割成所要求的宽度,形成试纸条。
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