[发明专利]二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤装置及方法

权利要求书

1.一种二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤装置，其特征在于，包括通过管路(3)依次连通的第一级切向流超滤系统(1)、第一蠕动泵(4)以及第二级切向流超滤系统(2)，所述第一蠕动泵(4)用于驱动所述第一级切向流超滤系统(1)内部的液体流至所述第二级切向流超滤系统(2)；

且所述第一级切向流超滤系统(1)内设置有第一过滤膜(11)，所述第二级切向流超滤系统(2)内设置有第二过滤膜(21)，所述第一过滤膜(11)与所述第二过滤膜(21)通过所述第一蠕动泵(4)相连通；所述第二过滤膜(21)的过滤孔孔径小于所述第一过滤膜(11)的过滤孔孔径。

2.根据权利要求1所述的二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤装置，其特征在于，所述第一过滤膜(11)的过滤孔孔径大于等于0.18μm，所述第二过滤膜(21)的过滤孔孔径小于等于0.03μm；且所述的第一过滤膜以及第二过滤膜均为盒式平板膜。

3.根据权利要求1所述的二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤装置，其特征在于，所述第一级切向流超滤系统(1)内设置有一过滤液容器(12)，所述第二级切向流超滤系统(2)内设置有一富集液容器(22)，且所述过滤液容器(12)与所述第一过滤膜(11)下游通过所述管路(3)连通，所述富集液容器(22)与所述第二过滤膜(21)的上游和下游通过所述管路(3)连通，使得液体在所述超滤装置流动时，通过所述第一过滤膜(11)的液体流入所述过滤液容器(12)中，未通过所述第二过滤膜(21)的液体流入富集液容器(22)中。

4.根据权利要求3所述的二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤装置，其特征在于，所述富集液容器(22)与所述第二过滤膜之间设置有一单向阀(6)和一个循环泵(5)，且该单向阀(6)的流向为从所述富集液容器(22)至所述第二过滤膜，所述循环泵(5)用于驱动所述第二级切向流超滤系统(2)内部的液体循环流动。

5.根据权利要求4所述的二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤装置，其特征在于，所述第二过滤膜(21)出口端与一回收容器(8)相连通，所述回收容器(8)用于回收经过所述循环泵(5)循环结束后通过所述第二过滤膜(21)的液体。

6.根据权利要求1所述的二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤装置，其特征在于，所述第一过滤膜(11)的进口端的所述管路(3)与一待提取液容器(7)相连通；使得液体在所述超滤装置流动时，未通过所述第一过滤膜(11)的液体流入所述待提取液容器(7)中。

7.根据权利要求6所述的二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤装置，其特征在于，所述第一级切向流超滤系统(1)内设置有一第二蠕动泵(9)，且所述第二蠕动泵的进口与所述待提取液容器(7)相连通，所述第二蠕动泵的出口与所述第一过滤膜(11)的进口端相连通；所述第二蠕动泵用于驱动所述待提取液容器(7)内的液体流至所述第一级切向流超滤系统(1)。

8.一种二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤方法，其特征在于，采用权利要求1-7任一项超滤装置进行超滤，所述超滤方法包括以下步骤：

S1：将含外泌体的待提取液通入至管路(3)中，所述待提取液流经第一级切向流超滤系统(1)的第一过滤膜进行初次过滤得到过滤液；所述第一过滤膜的过滤孔孔径大于所述外泌体；

S2：步骤S1的过滤液流经第二级切向流超滤系统(2)的第二过滤膜进行再次过滤进行富集和浓缩，得到被第二过滤膜(21)过滤后的过滤液以及纯化后的外泌体富集液；所述第二过滤膜(21)的过滤膜孔径小于所述外泌体；

S3：将步骤S2中得到的外泌体富集液进行再次循环超滤，最终在第二级切向流超滤系统(2)内得到纯化浓缩后的外泌体富集液。

9.根据权利要求8所述的二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述含外泌体的待提取液为细胞培养基上清液。

10.根据权利要求8所述的二次两级切向流分离纯化和浓缩外泌体的超滤方法，其特征在于，所述步骤S3中，循环超滤在所述第二级切向流超滤系统(2)内进行，具体为：在步骤S2处理后，通过将所述富集液通入至第二级切向流超滤系统(2)内进行再次超滤，且所述再次超滤的次数大于等于1次。