[发明专利]CVA16检测引物及检测方法

权利要求书

1.一组引物，其特征在于：包括两条置换引物F1和F2，两条交叉内引物CP1和CP2，6条扩增引物C1和C2、D1和D2、R1和R2；

所述置换引物F1的序列如SEQ ID NO:1所示，所述置换引物F2的序列如SEQ ID NO:2所示，所述交叉引物CP1的序列如SEQ ID NO:3所示，所述交叉引物CP2的序列如SEQ ID NO:4所示，所述扩增引物C1的序列如SEQ ID NO:5所示，所述扩增引物C2的序列如SEQ ID NO:7所示，所述扩增引物D1的序列如SEQ ID NO:8所示，引物D2的序列如SEQ ID NO:10所示，扩增引物R1的序列如SEQ ID NO:11所示，扩增引物R2的序列如SEQ ID NO:12所示。

2.根据权利要求1所述引物，其特征在于：所述引物包括标记引物；选择任意两条及以上的扩增引物，在5’端进行可检测标记，即获得标记引物。

3.根据权利要求1所述引物，其特征在于：包括标记引物C1*和/或标记引物D1*；在扩增引物C1的5’端标记生物素或半抗原获得标记引物C1*，在扩增引物D1的5’端标记生物素或半抗原获得标记引物D1*。

4.一组引物，其特征在于：包括两条置换引物F1和F2，两条交叉内引物CP1和CP2，扩增引物C1、C1*和C2、D1、D1*和D2、R1和R2；

所述置换引物F1的序列如SEQ ID NO:1所示，所述置换引物F2的序列如SEQ ID NO:2所示，所述交叉引物CP1的序列如SEQ ID NO:3所示，所述交叉引物CP2的序列如SEQ ID NO:4所示，所述扩增引物C1的序列如SEQ ID NO:5所示，所述扩增引物C1*的序列如SEQ ID NO:6所示，所述扩增引物C2的序列如SEQ ID NO:7所示，所述扩增引物D1的序列如SEQ ID NO:8所示，所述扩增引物D1*的序列如SEQ ID NO:9所示，引物D2的序列如SEQ ID NO:10所示，扩增引物R1的序列如SEQ ID NO:11所示，扩增引物R2的序列如SEQ ID NO:12所示。

5.权利要求1～4任意一项所述引物在检测CVA16中的应用。

6.根据权利要求5所述应用，其特征在于：使用所述引物构建反应体系，进行MCDA扩增反应。

7.根据权利要求6所述应用，其特征在于：反应温度为61～68℃。

8.根据权利要求6所述应用，其特征在于：所述反应体系包括：所述引物、Betaine、MgSO₄、dNTP、DNA聚合酶缓冲液、链置换DNA聚合酶、待检测病毒模板。

9.根据权利要求6所述应用，其特征在于：MCDA扩增反应结束后，利用可视颜色法或生物传检测器检测扩增结果。

10.利用权利要求1～4任意一项所述引物制备的检测试剂、检测试纸、试剂盒。