[发明专利]一种基于黄原胶的HRP标记鼠抗人肌钙蛋白I单克隆抗体及其制备方法、试剂盒

权利要求书

1.一种基于黄原胶的HRP标记鼠抗人肌钙蛋白I单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括：

步骤一、氧化黄原胶得到含醛基的黄原胶；

步骤二、将所述含醛基的黄原胶与辣根过氧化物酶聚合得到辣根过氧化物酶多聚物；

步骤三、对所述辣根过氧化物酶多聚物进行纯化；

步骤四、鼠抗人肌钙蛋白I单克隆抗体连接到纯化后的辣根过氧化物酶多聚物上；

步骤五、对步骤四的产物纯化，得所述HRP标记鼠抗人肌钙蛋白I单克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法具体实施如下：

步骤一、5-8mg黄原胶与15-25mg高碘酸钠反应，得到含醛基的黄原胶；

步骤二、步骤一得到的含醛基的黄原胶中加入5-15mg辣根过氧化物酶，充分混匀后再加入35-45mg三乙酰基硼氢化钠，3-5℃旋转，得辣根过氧化物酶多聚物；

步骤三、步骤二得到的辣根过氧化物酶多聚物用磷酸盐缓冲液透析，得透析物；

步骤四、步骤三得到的透析物中加入2-4mg鼠抗人肌钙蛋白I单克隆抗体充分混合后加入三乙酰基硼氢化钠，旋转反应3-5小时；

步骤五、磷酸盐缓冲液透析换液，取出透析物，得所述HRP标记鼠抗人肌钙蛋白I单克隆抗体。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤一中，通过高碘酸钠氧化黄原胶。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤一中，5-8mg黄原胶与15-25mg高碘酸钠反应，得到含醛基的黄原胶。

5.根据权利要求2至4任一项所述的制备方法，其特征在于，黄原胶先溶解于10-100mMpH为9-10的碳酸盐缓冲液中，再加入高碘酸钠。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤二中，步骤一得到的含醛基的黄原胶中加入5-15mg辣根过氧化物酶，混匀后加入35-45mg三乙酰基硼氢化钠，3-5℃旋转过夜得辣根过氧化物酶多聚物。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤三和/或步骤五中，用磷酸盐缓冲液透析进行纯化；和/或，步骤三和/或步骤五中，选用分子截留量为2000-4000D透析袋，在3-5℃下透析8-12小时以进行纯化，得透析产物。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤四中，步骤三得到的透析物中加入2-4mg鼠抗人肌钙蛋白I单克隆抗体充分混合后加入三乙酰基硼氢化钠，旋转反应3-5小时。

9.一种根据权利要求1至8任一项所述的制备方法制得的基于黄原胶的HRP标记鼠抗人肌钙蛋白I单克隆抗体。

10.一种用于检测急性心肌梗死的试剂盒，其特征在于，包括根据权利要求1至8任一项所述的制备方法制得的基于黄原胶的HRP标记鼠抗人肌钙蛋白I单克隆抗体，或包括根据权利要求9所述的基于黄原胶的HRP标记鼠抗人肌钙蛋白I单克隆抗体。