[发明专利]一种产乳酸牛链球菌及其分离方法

权利要求书

1.一种产乳酸牛链球菌，其特征在于：该牛链球菌取自牛的粪便中。

2.一种产乳酸牛链球菌的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：原料制取

取正常牛的粪便100克，对其进行稀释，过滤杂质，留下滤液，装入无菌厌氧密封袋中并密封；

S2：制备培养基

以水为溶质，向其中加入以下质量份数：可溶性淀粉2.0-4.0克、葡萄糖10-30克、磷酸氢二钾0.5-1.5克、碳酸钙3-5克、硫酸镁0.2-0.4克、酵母粉0.4-0.6克、琼脂20-40克、1％结晶紫溶液1毫升；

S3：进行培养

取S1中滤液10毫升，将其与S2中制得的培养基进行混合，并置于厌氧培养瓶中，继续放置于37℃保温箱中震荡培养24小时；

S4：进行分离

除去厌氧培养瓶中的培养液，保留沉淀物，挑取少许沉淀，置于分离培养板中，在厌氧条件下37到39℃避光培养24到36小时，挑选表面湿润、有光泽、颜色为乳白色的圆滴状菌落，进行革兰氏染色鉴定，选择鉴定结果为革兰氏阳性的菌落进一步转移至新的分离培养板中分离培养；

S5：进行保存

用接种棒挑出纯菌株的菌落，转至含保存培养基的冻存管中，旋盖密封，并涡旋震荡30秒，投入液氮速冻，随后再转移至－80℃超低温冰箱长期保存。

3.根据权利要求2所述的一种产乳酸牛链球菌的分离方法，其特征在于：所述S2中，其制备方法为：把淀粉放在烧杯里，用5毫升水调成糊状后，倒入95毫升水，搅匀后加入其他组分，使它溶解，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水至总容量为1000毫升，调整pH值到7.2～7.4，分装后灭菌，备用。

4.根据权利要求2所述的一种产乳酸牛链球菌的分离方法，其特征在于：所述S4中，重复分离培养和鉴定的次数为五次，以得到纯菌种。