[发明专利]一种用于检测西伯利亚鲟线粒体基因的引物探针组合物、试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种用于检测西伯利亚鲟线粒体基因D-LOOP的引物探针组合物，其特征在于，所述引物探针组合物包括SEQ ID NO.1所示的单链DNA分子和SEQ ID NO.2所示的单链DNA分子组成的引物对，以及SEQ ID NO.3所示的TaqMan-MGB探针。

2.根据权利要求1所述的用于检测西伯利亚鲟线粒体基因D-LOOP的引物探针组合物，其特征在于，所述TaqMan-MGB探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有MGB无荧光淬灭基团。

3.权利要求1或2所述的用于检测西伯利亚鲟线粒体基因D-LOOP的引物探针组合物在检测西伯利亚鲟线粒体基因中的应用。

4.权利要求1或2所述的用于检测西伯利亚鲟线粒体基因D-LOOP的引物探针组合物在制备检测西伯利亚鲟线粒体基因的试剂或试剂盒中的应用。

5.一种用于检测西伯利亚鲟线粒体基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的有效成分为权利要求1或2所述的引物探针组合物。

6.根据权利要求5所述的用于检测西伯利亚鲟线粒体基因的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括荧光定量PCR反应的试剂。

7.一种检测西伯利亚鲟线粒体基因的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)提取待测样品中的DNA；

2)以步骤1)提取的DNA为模板，利用权利要求1或2所述的引物探针组合物进行荧光定量PCR扩增反应，获得扩增曲线和Ct值；

3)根据扩增曲线和Ct值进行结果判断，具体判断方法为：

若待测样品的扩增曲线呈S形且Ct值30，则待测样本为阳性，即待测样本含有西伯利亚鲟线粒体基因，该样品为西伯利亚鲟纯种或者是母本基因来自西伯利亚鲟的杂交鲟；

若待测样品无典型扩增曲线或无Ct值时，则待测样本为阴性，即待测样本中不含有西伯利亚鲟线粒体基因，则该样品不是西伯利亚鲟纯种；

若待测样品的Ct值≥30时，须复检再予以判断。

8.根据权利要求7所述检测西伯利亚鲟线粒体基因的方法，其特征在于，所述待测样品为鲟鱼的鳍条组织及含有鲟鱼源性成分的食品或化妆品。