[发明专利]虎脂肪间充质干细胞培养液和虎脂肪间充质干细胞的培养方法

权利要求书

1.一种虎脂肪间充质干细胞培养液，其特征在于，每100mL所述虎脂肪间充质干细胞培养液包含10mL～15mL胎牛血清、0.5mL～1.5mL双抗溶液、0.5mL～1.5mL谷氨酰胺溶液、400ng～600ng TGF-a和400ng～600ng PGE1，以及细胞基础培养液，

所述双抗溶液包含0.08U/L～0.12U/L青霉素和0.08μg/L～0.12μg/L链霉素，

所述谷氨酰胺溶液包含1mmol/L～3mmol/L谷氨酰胺。

2.根据权利要求1所述的虎脂肪间充质干细胞培养液，其特征在于，每100mL所述虎脂肪间充质干细胞培养液包含10mL～12mL胎牛血清、0.8mL～1.2mL双抗溶液、0.8mL～1.2mL谷氨酰胺溶液、450ng～550ng TGF-a和400ng～600ng PGE1，以及细胞基础培养液。

3.根据权利要求1或者2所述的虎脂肪间充质干细胞培养液，其特征在于，所述细胞基础培养液包含a-MEM液体培养基。

4.一种虎脂肪间充质干细胞的培养方法，其特征在于，所述培养方法包括采用权利要求1至3任一项所述的虎脂肪间充质干细胞培养液对虎脂肪间充质干细胞进行培养的步骤。

5.根据权利要求4所述的虎脂肪间充质干细胞的培养方法，其特征在于，所述虎脂肪间充质干细胞来源于孟加拉虎。

6.根据权利要求4所述的虎脂肪间充质干细胞的培养方法，其特征在于，培养的阶段为原代培养或/和传代培养。

7.根据权利要求4至6任一项所述的虎脂肪间充质干细胞的培养方法，其特征在于，获取所述虎脂肪间充质干细胞的步骤包括：采用胶原酶液对虎脂肪组织进行消化。

8.根据权利要求7所述的虎脂肪间充质干细胞的培养方法，其特征在于，所述胶原酶的种类为Ⅰ型胶原酶；

或/和，消化的条件包括：消化温度为36.5℃～37.5℃，消化时长≥30min；

或/和，所述胶原酶液的体积是虎脂肪组织的体积的8倍～12倍，所述胶原酶液含胶原酶的质量百分比为0.8％～1.2％。

9.根据权利要求7所述的虎脂肪间充质干细胞的培养方法，其特征在于，所述虎脂肪组织经双抗溶液浸泡后再采用所述胶原酶液消化。

10.根据权利要求9所述的虎脂肪间充质干细胞的培养方法，其特征在于，所述双抗溶液包括双抗质量百分比为18％～22％的第一浓度梯度溶液、双抗质量百分比为8％～12％的第二浓度梯度溶液和双抗质量百分比为4.5％～5.5％的第三浓度梯度溶液，所述虎脂肪组织在所述第一浓度梯度溶液、所述第二浓度梯度溶液和所述第三浓度梯度溶液中依次浸泡的时长为4.5min～5.5min、4.5～5.5min、4.5～5.5min；

或/和，所述双抗溶液的溶剂包含磷酸盐缓冲液。