[发明专利]γ-氨基丁酸检测方法和用于改善睡眠、抗焦虑的组合物

权利要求书

1.一种γ-氨基丁酸检测方法，其特征在于，适用于检测包含米胚芽粉和γ-氨基丁酸粉的用于改善睡眠、抗焦虑的组合物中的γ-氨基丁酸含量，所述检测方法包括：

利用含水提取溶液制备待测组合物的试样溶液；利用所述提取溶液或水溶液和γ-氨基丁酸标准样品制备多个不同浓度的标准工作溶液；

在设定检测条件下，利用高效液相色谱仪获取试样溶液的色谱图；基于各标准工作溶液对应的在所述设定检测条件下获得的色谱图，利用所述试样溶液的色谱图得到待测组合物的γ-氨基丁酸含量；其中，所述设定检测条件包括：流动相包含乙腈和三水合乙酸钠溶液且为梯度洗脱。

2.根据权利要求1所述的γ-氨基丁酸检测方法，其特征在于，

利用含水提取溶液制备待测组合物的试样溶液，包括：

称取第一数值克数的待测组合物的样品，并量取第二数值毫升的提取溶液，将称取的样品和量取的提取溶液均匀混合，得到第一混合液；

对所述第一混合液进行离心处理，并从离心处理后的所述第一混合液中提取上清液，或者还进行至少一次利用所述第二数值毫升的提取溶液对从离心处理后的所述第一混合液提取上清液后剩余的样品残渣提取上清液的操作；

将各次提取的上清液合并在一起并利用所述提取溶液定容至第三数值毫升，摇匀后得到试样溶液；所述第二数值是所述第一数值的50～150倍，所述第三数值是第二数值的5～15倍；所述提取溶液为乙醇和水的混合溶液；

在设定检测条件下，利用高效液相色谱仪获取试样溶液的色谱图；基于各标准工作溶液对应的在所述设定检测条件下获得的色谱图，利用所述试样溶液的色谱图得到待测组合物的γ-氨基丁酸含量，包括：

分别取相同毫升的空白样液、所述试样溶液及多个不同浓度的标准工作溶液，并分别进行衍生化反应；其中，所述多个不同浓度的标准工作溶液是通过利用提取溶液或水对标准品储备液逐级稀释得到的，所述标准品储备液是通过利用提取溶液或水溶解γ-氨基丁酸标准样品得到，所述空白样液为提取溶液；

在设定检测条件下，利用高效液相色谱仪分别检测衍生化反应的空白样液、所述试样溶液及多个不同浓度的标准工作溶液的色谱图；

根据衍生化反应后的多个不同浓度的标准工作溶液的色谱图建立标准浓度曲线，并依据所述标准浓度曲线根据衍生化反应后的试样溶液和空白样液的色谱图得到待测组合物的样品的γ-氨基丁酸含量。

3.根据权利要求2所述的γ-氨基丁酸检测方法，其特征在于，

称取第一数值克数的待测组合物的样品，并量取第二数值毫升的提取溶液，将称取的样品和量取的提取溶液均匀混合，得到第一混合液，包括：

称取第一数值克数的待测组合物的样品于离心管中，并在所述离心管中加入量取的第二数值毫升的提取溶液，对离心管中溶液依次进行超声、振荡及静置操作，以将称取的样品和量取的提取溶液均匀混合，得到第一混合液；

对所述第一混合液进行离心处理，并从离心处理后的所述第一混合液中提取上清液，还利用所述第二数值毫升的提取溶液对从离心处理后的所述第一混合液提取上清液后剩余的样品残渣提取上清液的操作，包括：

将所述第一混合液盛装在离心管中进行离心处理，并从离心处理后的所述第一混合液中提取上清液转入容量瓶中，并将样品残渣保留在离心管中；

向离心管中的样品残渣加入第二数值的提取溶液，对离心管中样品残渣和提取溶液的混合液依次进行超声、振荡及静置操作，得到第二混合液；

对所述第二混合液进行离心处理，并从离心处理后的所述第二混合液中提取上清液转入所述容量瓶，以将各次提取的上清液合并在一起；

分别取相同毫升的空白样液、所述试样溶液及多个不同浓度的标准工作溶液，并分别进行衍生化反应，包括：

利用水溶解γ-氨基丁酸标准样品并进行定容，得到标准品储备液；

利用提取溶液对所述标准品储备液进行逐级稀释，得到多个不同浓度的标准工作溶液；

取第四数值毫升的提取溶液作为空白样液，并取第四数值毫升的所述试样溶液及第四数值毫升的各不同浓度的标准工作溶液，放入相应的具塞试管中；

在各具塞试管中加入碳酸氢钠溶液和DABS-Cl衍生试剂，分别混匀后在水浴中进行衍生化反应；

利用微孔滤膜对各具塞试管中衍生化反应后的混合液进行过滤，得到衍生化反应后的空白样液、所述试样溶液及多个不同浓度的标准工作溶液。