[发明专利]一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂及其制备方法、应用

权利要求书

1.一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂，其特征在于，包括如下重量份的组分：20-40份耐硼赖氨酸芽孢杆菌发酵液和8-12份辅料；所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌发酵液是由耐硼赖氨酸芽孢杆菌经二次发酵培养所得。

2.根据权利要求1的一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂，其特征在于，所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌发酵液是由耐硼赖氨酸芽孢杆菌加入聚谷氨酸，经二次发酵培养所得。

3.根据权利要求1或2的一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂，其特征在于，所述耐硼赖氨酸芽孢杆菌发酵液的制备方法，包括如下步骤：

(1)取耐硼赖氨酸芽孢杆菌1-2环，接种至种子培养液，以120-180r/min、36-38℃活化培养12-16h，得活化菌液；

(2)按体积比为2：5，取活化菌液接种至增殖培养液，以120-180r/min、36-38℃增殖培养至菌液OD₆₀₀值为4.8-2.5，得增殖菌液；

(3)按体积比为2：7，取增殖菌液接种至发酵培养液，35-36℃发酵培养4-6h后，以发酵培养液计，加入0.02-0.04wt％聚谷氨酸，35-36℃发酵培养6-8h，得发酵菌液；

(4)将发酵菌液以7000-9000r/min离心8-12min，取上清液，0.20-0.24μm滤膜过滤，得耐硼赖氨酸芽孢杆菌发酵液。

4.根据权利要求3的一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂，其特征在于，所述种子培养液包括以下组分：4.8-5.2g/L酵母提取物、9.5-10.5g/L胰化蛋白胨和9.5-10.5g/L氯化钠，pH值7.0-7.2；

所述增殖培养液包括以下组分：4.8-5.2g/L酵母提取物、9.5-10.5g/L胰化蛋白胨、9.5-10.5g/L氯化钠和2.2-3.2g/L聚谷氨酸，pH值7.0-7.2；

所述发酵培养液包括以下组分：4.8-5.2g/L酵母提取物、9.5-10.5g/L胰化蛋白胨、9.5-10.5g/L氯化钠、0.8-1.8g/L聚谷氨酸和0.2-0.5g/L岩白菜素，pH值6.7-7.0。

5.根据权利要求1的一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂，其特征在于，所述辅料为水、培养基、甘油中的至少一种。

6.根据权利要求5的一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂，其特征在于，所述培养基为LB培养基。

7.根据权利要求1或2的一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂，其特征在于，还包括12-16份载体；所述载体为溶剂、填料、粘结剂中的一种或多种。

8.根据权利要求1～7任意一项的一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将耐硼赖氨酸芽孢杆菌发酵液和辅料混合，加入载体，搅拌，喷雾干燥，粉碎，得生防菌剂。

9.根据权利要求8的一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂的应用，其特征在于，所述生防菌剂在预防或治疗无乳链球菌引起感染的疾病中。

10.根据权利要求8的一种用于抑制无乳链球菌的生防菌剂的应用，其特征在于，所述生防菌剂在预防或治疗罗非鱼链球菌病的应用中。