[发明专利]一种猪传染性胃肠炎病毒及其应用

说明书

本发明提供了一种猪传染性胃肠炎病毒及其应用，所述猪传染性胃肠炎病毒命名为猪传染性胃肠炎病毒TGEV‑HuN，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.20279，保藏日期为2021年6月2日。本发明还提供了所述猪传染性胃肠炎病毒的分离方法、一种猪传染性胃肠炎疫苗及其制备方法。本发明所述猪传染性胃肠炎病毒具有较强的毒力及传染性，制成疫苗后，免疫原性远高于传统毒株，免疫母猪的后代也具有对猪传染性胃肠炎病毒的抵抗能力，并且克服了传统毒株疫苗因毒株变异导致的疫苗防护能力差的缺点；稳定性好，制备方法简单，成本较低，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于疫苗制备技术领域，尤其涉及一种猪传染性胃肠炎病毒及其应用。

背景技术

猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible Gastroenteritis Virus，TGEV)可引起以严重腹泻、呕吐、脱水以及食欲下降等为主要特征的肠道传染病，发病率可高达100％，死亡率为30％～80％，是导致仔猪在早期死亡的主要疾病之一，给许多国家的养猪业造成了巨大的经济损失。

目前已有一些关于猪传染性胃肠炎病毒的预防及治疗的方法。CN112080455A公开了一种表达分泌抗猪传染性胃肠炎病毒单链抗体的重组乳酸乳球菌及其制备方法，通过分泌表达抗猪传染性胃肠炎病毒单链抗体的融合序列，能够与猪传染性胃肠炎病毒特异性结合，可用于阻断猪传染性胃肠炎病毒的感染。但是此制备方法过于复杂，对技术人员的水平要求较高，且生产成本昂贵，限制了相关产品的实际应用。

目前猪传染性胃肠炎以疫苗免疫预防为主，但现有商品化疫苗免疫效果不佳，且生产成本较高。因此，如何提供一种制备方法简单、免疫效果较好的猪传染性胃肠炎疫苗，已成为亟待解决的问题。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供一种猪传染性胃肠炎病毒及其应用，可以有效解决因毒株变异导致现有疫苗免疫效果不佳的问题，且制备方法简单，生产成本较低，具有实际应用的价值。

为达此目的，本发明采用如下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种猪传染性胃肠炎病毒，所述猪传染性胃肠炎病毒命名为猪传染性胃肠炎病毒TGEV-HuN，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.20279，保藏日期为2021年6月2日。

本发明中，所述猪传染性胃肠炎病毒为当前猪传染性胃肠炎病毒的新流行株，毒力强，患病动物致死率高，并且由于毒株的变异，现有的疫苗无法取得有效的防护效果。以此毒株为免疫抗原，制备得到的疫苗可以为猪传染性胃肠炎的预防提供保障。

第二方面，本发明提供了一种第一方面所述的猪传染性胃肠炎病毒的分离方法，所述分离方法包括：

使用病猪粪便制备病毒粗提液，再将所得病毒粗提液接种在细胞中，培养，收集细胞培养液，得到所述猪传染性胃肠炎病毒。

本发明中，所述分离方法操作简单，对工作人员的技术水平要求较低；病毒来源容易获得，分离成本较低，为相关疾病的预防与治疗创造了条件。

优选地，所述病毒粗提液的制备方法包括：

将所述病猪粪便与PBS溶液混合，冷冻融化，震荡后离心，收集上清，即所述的病毒粗提液。

优选地，所述PBS溶液的pH值为7.0～7.8，例如可以是7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7或7.8等。

优选地，所述冷冻融化的次数为2～4次，例如可以是2次、3次或4次。

优选地，所述冷冻的温度为-22～-18℃，例如可以是-22℃、-21℃、-20℃、-19℃或-18℃等。