[发明专利]一种怀牛膝多糖、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种怀牛膝多糖的应用，其特征在于，用于制备抑制胰脂肪酶活性药物及减肥药物；所述怀牛膝多糖为均一多糖AB-1-1，由果糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖组成，所述怀牛膝多糖重均分子量为3.998×10³Da±3.998×10³Da×3.936％，由糖苷键连接，所述糖苷键型包括T-α-D-Glcp、→1)-β-D-Fruf-(2→、→2)-β-D-Fruf-(6→、→1，6)-β-D-Fruf-(2→和β-D-Fruf-(2→；

所述的怀牛膝多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)粉碎怀牛膝药材，无水乙醇回流提取，过滤，除去小分子杂质，取药渣烘干，将药渣进行回流提取，过滤合并滤液，减压浓缩加入无水乙醇沉淀，静置，除去上层澄清溶液收集沉淀，依次用无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤，加水溶解多糖沉淀，采用Savage法反复脱蛋白，收集除去蛋白后的牛膝多糖溶液，冷冻干燥，得到精制牛膝多糖；

(2)称取步骤(1)所得精制牛膝多糖配制成饱和溶液，经DEAE-FF柱梯度洗脱进行初分离，采用硫酸-蒽酮法显色，紫外检测，以吸光度值为纵坐标，收集管数为横坐标绘制洗脱曲线，根据洗脱曲线合并收集样品液，透析冻干，得到牛膝多糖粉末；

(3)取步骤(2)冻干后的牛膝多糖粉末，溶解并离心除去不溶性杂质，经Sephadex G-25柱进行分离纯化，洗脱收集，采用硫酸-蒽酮法显色，紫外检测，以吸光度值为纵坐标，收集管数为横坐标绘制洗脱曲线，根据洗脱曲线合并收集样品，冷冻干燥，得到所述怀牛膝多糖化合物；

其中，步骤(2)中，所述梯度洗脱，流动相为依次采用水、0.1M NaCl溶液、0.2M NaCl溶液、0.3M NaCl溶液、0.4M NaCl溶液、0.5M NaCl溶液，洗脱流速2.0-3.0mL/min，40-50mL/T自动收集；步骤(3)中，所述梯度洗脱，流动相为蒸馏水，洗脱流速为0.3-0.5mL/min，20-35min/T洗脱收集。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述多糖数均分子量为3.902×10³Da±3.902×10³Da×3.753％，特性黏度值为4.34mL/g±4.34mL/g×2.03％。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤(1)中，加入4-5倍体积无水乙醇于50-90℃冷凝回流提取2-5次，每次0.5-3h，过滤，药渣烘干后，加入5-15倍体积蒸馏水50-80℃冷凝回流提取1-5次，每次0.5-3h，过滤，合并滤液，45-55℃减压浓缩。