[发明专利]桑花叶型矮缩相关双生病毒的LAMP检测引物组及其可视化检测方法

权利要求书

1.一种桑花叶型矮缩相关双生病毒的LAMP检测引物组，其特征在于：为基于MMDaV V2基因序列设计的三组引物，其中，V2基因序列如Seq ID NO：1所示；引物组如下所示：

FIP：5'-GACTCGAACAGTCCTGGGCCT-CTGAGATCAAGGCGGGGA-3'

BIP：5'-GTTGCAAGTGCCATGCGAACC-GGCCGTCTCTTCCTTCTTG-3'

F3：5'-TGATTACCAGGAGCTCTGCT-3'

B3：5'-GTTTCACTGGGCCCAACG-3'

LF：5'-CCGTGGAATGGTTCCTGGATTC-3'

LB：5'-CGTGGAGAAGAAGAGGCCCAAG-3'；

序列分别如SEQ ID NO：2-7所示。

2.根据权利要求1所述的LAMP检测引物组的桑花叶型矮缩相关双生病毒的可视化检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)植物总DNA的提取：采用CTAB方法从采集的感染桑花叶型矮缩相关双生病毒的桑树中提取植物基因组总DNA；

(2)LAMP反应：以该植物基因组总DNA为模板，采用权利要求1所述的LAMP检测引物组进行LAMP反应；

(3)LAMP产物显色反应：在LAMP产物中加入SYBR Green I染料，拍照记录，有绿色荧光的判断为阳性，显示黄棕色的为阴性；

(4)LAMP产物琼脂糖凝胶电泳分析：取5μL显色过的样品，用1.5％琼脂糖凝胶电泳分析，有阶梯状条带的判断为阳性，无条带的为阴性。

3.权利要求2所述的可视化检测方法在桑花叶型矮缩相关双生病毒的特异性分析。

4.权利要求2所述的可视化检测方法在桑花叶型矮缩相关双生病毒的灵敏度分析。

5.权利要求2所述的可视化检测方法在桑花叶型矮缩相关双生病毒防治中的应用。