[发明专利]槐花原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法

说明书

本发明公开了槐花原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法，涉及药材检验技术领域。本发明以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，包括以下步骤：步骤S1：梯度洗脱时长0‑28min，取流动相A占比10‑18％，流动相B占比90‑82％；步骤S2：梯度洗脱时长28‑48min，取流动相A占比18‑35％，流动相B占比82‑65％；步骤S3：梯度洗脱时长48‑56min，取流动相A占比35‑50％，流动相B占比65‑50％；步骤S4：梯度洗脱时长56‑60min，取流动相A占比50‑10％，流动相B占比50‑90％；步骤S5：梯度洗脱时长60‑65min，取流动相A占比10％，流动相B占比90％。本发明有效弥补了目前国家没有槐花原药材及饮片特征图谱检验方法的空缺。

技术领域

本发明涉及药材检验技术领域，特别是涉及槐花原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法。

背景技术

槐花是中国的传统中药材，具有凉血止血，清肝泻火的作用，临床应用广泛，用量极大；

目前槐花原药材及饮片检验标准为《中国药典》2020版一部，暂无特征图谱检验方法，槐花原药材及饮片检测时保留时间不稳定，锋面积不稳定，锋状态、主峰等一系列色谱条件不稳定，存在一定的局限性；因此，我们提出槐花原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法。

发明内容

本发明的目的在于提供槐花原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法，通过设计出保留时间稳定，锋面积稳定，锋状态、主峰等一系列色谱条件稳定的可施行的特征图谱的检验方法，以解决上述背景中提出的问题。

为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明为槐花原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法，所述色谱条件与系统适用性试验包括以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，包括以下步骤：

步骤S1：梯度洗脱时长0-28min，取流动相A占比10-18％，流动相B占比90-82％；

步骤S2：梯度洗脱时长28-48min，取流动相A占比18-35％，流动相B占比82-65％；

步骤S3：梯度洗脱时长48-56min，取流动相A占比35-50％，流动相B占比65-50％；

步骤S4：梯度洗脱时长56-60min，取流动相A占比50-10％，流动相B占比50-90％；

步骤S5：梯度洗脱时长60-65min，取流动相A占比10％，流动相B占比90％。

优选地，所述填充剂柱长150mm，内径为4.6mm，粒径为5.0μm。

优选地，所述步骤S1-步骤S5中，检测波长为257nm；流速为每分钟0.8ml；柱温为30℃；理论板数按芦丁峰计算不低于2000。

优选地，所述参照物溶液制备，包括如下步骤：

步骤1，取槐花对照药材0.1g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率25kHz)10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过；

步骤2，精密量取续滤液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照药材参照物溶液；

步骤3，另取芦丁对照品适量，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品参照物溶液。

优选地，所述供试品溶液制备，包括如下步骤：

步骤4，取本品适量，研细，取0.05g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率25kHz)10分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过；