[发明专利]一种HPLC法测定维生素B6及其有关杂质的方法

说明书

本发明的目的在于提供一种HPLC法测定维生素B6及其有关杂质的方法。本发明的方法能同时测定维生素B6和杂质A(编号H029‑S‑I‑06)以及多种相关杂质，提高了分离检测的效率，确保维生素B6原料药及其制剂的质量可控。本发明的技术方案为：所述方法中采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱，进入检测器进行检测。流动相A：0.01mol/l辛烷磺酸钠溶液(pH2.5)‑乙腈(80‑20)；流动相B：乙腈。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种HPLC法测定维生素B6及其有关杂质的方法。

背景技术

维生素B6的主要商品形式吡哆醇盐酸盐，广泛应用于饲料添加剂、食品添加剂、保健品、药品等领域。

目前，工业上普遍采用噁唑法合成维生素B6。该方法经Diels-Alder(狄尔斯-阿尔德)反应、芳构化反应、水解反应、精制步骤得到精制品维生素B6。

杂质的存在会降低疗效，甚至在有些情况下产生副作用。对新杂质的研究是一个动态发展和不断推进的过程。

目前维生素B6的含量测定方法中国药典方法和欧洲药典方法，这些测定方法，不能很好的检测新发现的杂质，不能更好的控制本品的质量。

所以需要开发一种能够更有效测定维生素B6及其相关杂质的方法，更有效地控制维生素B6药品的质量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种HPLC法测定维生素B6及其相关杂质的方法。本发明的方法能同时测定维生素B6和杂质H029-S-I-06以及多种相关杂质，提高了分离检测的效率，确保维生素B6原料药及其制剂的质量可控。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

HPLC法测定维生素B6及其相关杂质的方法，所述方法中采用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，采用流动相A和流动相B进行梯度洗脱，进入检测器进行检测；所述维生素B6及其相关杂质如下：

本发明HPLC(高效液相色谱)方法为：

溶剂：10％甲醇溶液

供试品溶液：取本品适量，精密称定，加溶剂溶解并定容，稀释制成每1ml中约含1mg的溶液。

色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(优选Agilent InfinityLabPoroshell120EC-C18，4.6*150mm，4μm)；流动相A：0.01mol/l辛烷磺酸钠溶液(pH2.5)-乙腈(80-20)；流动相B：乙腈；流速为1.0ml/min；检测波长为285nm；柱温为30℃；进样体积5μl。

测定法：精密量取供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图。按面积归一法计算。

本发明的方法能同时使维生素B6、和杂质H029-S-I-06、及多个相关杂质的主峰有效分离和检出，提高了分离检测的效率；能更精准的确保维生素B6原料药及其制剂的质量可控，并最终确定产品的安全有效。

中国药典2020(CP2020)和欧洲药典10(EP10)不能同时使维生素B6、H029-S-I-06及多个相关杂质的方法主峰有效分离和检出。特别是不能有效分离检出H029-S-I-06。

本发明提供一种维生素B6杂质,命名为维生素B6杂质A(杂质编号：H029-S-I-06)，结构式如下：

杂质A合成路线如下：

杂质A具体的制备方法：