[发明专利]用于辅酶Ⅰ含量检测的高效液相色谱分析方法及其应用在审
| 申请号： | 202111568518.1 | 申请日： | 2021-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN114236012A | 公开（公告）日： | 2022-03-25 |
| 发明（设计）人： | 武琳;陈修足;欧伶;邱蔚然 | 申请（专利权）人： | 上海蔚之星生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/86 |
| 代理公司： | 深圳市宾亚知识产权代理有限公司 44459 | 代理人： | 占国霞 |
| 地址： | 201100 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 辅酶 含量 检测 高效 色谱 分析 方法 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于辅酶Ⅰ含量检测的高效液相色谱分析方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、采用反向色谱柱，以碳十八烷基键合硅胶为填充剂；
S2、流动相为甲醇，10％四丁基氢氧化铵，磷酸，磷酸二氢钾等四种物质组成的混合溶剂。甲溶液组成的体积比例为甲醇5％，0.05M 10％四丁基氢氧化铵-0.05M磷酸二氢钾水溶液(磷酸调至pH4.0-5.0)95％。乙溶液组成的体积比例为甲醇30％，0.05M 10％四丁基氢氧化铵-0.05M磷酸二氢钾水溶液(磷酸调至pH4.0-5.0)70％；
S3、检测波长260nm，柱温25℃，流速1ml/min，进样体积20ul。
2.一种权利要求1所述高效液相色谱分析方法在测定酵母细胞热提取液中辅酶Ⅰ含量方面的应用，其特征在于：可以同时测定八种辅酶Ⅰ及其相关性物质，分别为氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)、还原型(NADH)、烟酰胺(N)、烟酰胺核苷(NR)、烟酰胺单核苷酸(NMN)、腺嘌呤(A)、腺嘌呤核苷(AR)、腺嘌呤单核苷酸(AMP)。
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