[发明专利]基于切伦科夫效应的酸响应纳米胶束及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于切伦科夫效应的酸响应纳米胶束，其特征在于，所述纳米胶束以焦脱镁叶绿酸a为光敏剂主体，所述光敏剂主体上修饰N,N-二异丙基氨为酸响应敏感基团，¹³¹I标记酪氨酸或⁶⁸Ga、¹⁷⁷Lu、⁸⁹Zr任一标记的四氮杂环十二烷四乙酸为切伦科夫光供体基团，聚乙二醇为亲水基团，并通过N-Alpha-芴甲氧羰基-N-Epsilon-叔丁氧羰基-L-赖氨酸作为上述功能基团的连接体；所述纳米胶束单体结构式如下sPS或者 sPS-2中任一所示：

；

所述纳米胶束为两亲性纳米胶束，直径在100-200 nm；所述纳米胶束制备过程中sPS或sPS-2配成10-30 mg/mL母液，随后将母液缓慢加入到缓冲溶液中搅拌过夜，控制母液与缓冲溶液的体积比为1:5-1:50。

2.一种权利要求1所述的基于切伦科夫效应的酸响应纳米胶束的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）酸响应基团的修饰：取N-Alpha-芴甲氧羰基-N-Epsilon-叔丁氧羰基-L-赖氨酸和2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N, N, N', N' -四甲基脲六氟磷酸酯 (HATU) 溶于二氯甲烷中，室温氮气保护搅拌，随后加入N,N-二异丙基乙二胺 (DPA) 和N,N-二异丙基乙胺 (DIPEA)，氮气保护条件下室温过夜反应完毕后洗涤，干燥后提纯得到化合物1；

（2）光敏剂基团的修饰：取三氟乙酸和无水二氯甲烷将化合物1加入其中，室温搅拌得到化合物2，取焦脱镁叶绿酸a溶于无水二氯甲烷中，随后加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC. HCl)和N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS)，氮气保护条件下避光室温搅拌，随后加入化合物2，过夜反应，洗涤干燥后提纯得化合物3；

（3）修饰核素可标记基团：取哌啶和无水二氯甲烷将化合物3加入其中，室温搅拌得到化合物4，取N-叔丁氧羰基-L-酪氨酸、NHS、EDC. HCl溶于无水二氯甲烷中，室温搅拌后加入化合物4及DIEPA反应过夜洗涤干燥提纯得到化合物5，取三氟乙酸和无水二氯甲烷将化合物5加入其中，室温搅拌得到化合物6；或者取化合物4，羟基琥珀酰亚胺-四氮杂环十二烷四乙酸、DIPEA溶于无水二氯甲烷中，室温搅拌后反应过夜洗涤干燥提纯得到化合物5’；

（4）优化材料亲疏水性：取羧基聚乙二醇、 EDC. HCl和NHS溶于无水二氯甲烷中，氮气保护下室温搅拌，随后加入化合物6，室温避光搅拌过夜，即得sPS；或者取化合物5’、 EDC.HCl和NHS溶于无水二氯甲烷中，氮气保护下室温搅拌，随后加入氨基聚乙二醇，室温避光搅拌过夜，即得sPS-2；

（5）纳米胶束的组装：将sPS或sPS-2溶于氯仿中，配成母液，随后将母液缓慢加入到缓冲溶液中搅拌过夜，即自组装分别得sPS NPs和sPS-2 NPs的纳米胶束；

（6）sPS NPs的放射性标记：取自组装的 sPS NPs纳米胶束于缓冲溶液中并置于管壁附着iodogen的EP管中，随后加入Na¹³¹I溶液，室温涡旋，脱盐处理，超滤离心浓缩得最终的¹³¹I-sPS NPs纳米胶束材料；

（7）sPS-2 NPs的放射性标记：取自组装的 sPS-2 NPs纳米胶束于缓冲溶液中，随后分别加入⁶⁸GaCl₃或⁸⁹ZrCl₄或¹⁷⁷LuCl₃溶液，加热反应，脱盐处理，超滤离心浓缩得最终的⁶⁸Ga-sPS-2 NPs或⁸⁹Zr -sPS-2 NPs或¹⁷⁷Lu -sPS-2 NPs纳米胶束材料。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）中反应完毕后，先后用饱和NaHCO₃溶液和饱和食盐水洗涤，干燥后用柱层析法提纯得到化合物1。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（5）中将sPS或sPS-2溶于氯仿中，配成10-30 mg/mL的母液，控制母液与pH 7.0-7.4 的PBS缓冲溶液的体积比为1:5-1:50。