[发明专利]一种高效递送siRNA的载药纳米粒及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种高效递送siRNA的载药纳米粒，其特征在于，所述siRNA载药纳米粒由Zn²⁺、槲皮素、siRNA和苯硼酸-透明质酸共轭物通过自组装形成，所述Zn²⁺与槲皮素络合后包载siRNA形成载药内核，所述苯硼酸-透明质酸共轭物包裹载药内核组装成高效递送siRNA的载药纳米粒，其制备方法包括以下步骤：

S1、将槲皮素与无水乙醇混合，加热搅拌溶解后加入Na₂CO₃，继续搅拌1～2h，最后加入锕化锌,经过搅拌、抽滤、无水乙醇洗涤后再抽滤，得到槲皮素与Zn²⁺的络合物；

S2、在透明质酸水溶液中加入碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，调节pH4～5活化0.5～1h，再加入4-氨甲基苯硼酸密闭反应24～36h，透析除杂后收集固体，冷冻干燥得到苯硼酸-透明质酸共轭物；

S3、将步骤S1制备的槲皮素与Zn²⁺的络合物和siRNA混合，弱碱性环境恒温孵育1～2h，随后滴加步骤S2制备得到的苯硼酸-透明质酸共轭物，最后滴加缓冲液，恒温孵育1～2h后过滤干燥得到高效递送siRNA的载药纳米粒。

2.根据权利要求1所述高效递送siRNA的载药纳米粒，其特征在于，所述siRNA为干扰去乙酰化酶基因表达的基因片段。

3.根据权利要求1所述高效递送siRNA的载药纳米粒，其特征在于，所述步骤S1中槲皮素、Na₂CO₃和锕化锌的摩尔比为1:2:2～4。

4.根据权利要求1所述高效递送siRNA的载药纳米粒，其特征在于，所述步骤S2中透明质酸、碳二亚胺、N-羟基琥珀酰亚胺和4-氨甲基苯硼酸的摩尔比为1:1～2:1～2:1～2。

5.根据权利要求1所述高效递送siRNA的载药纳米粒，其特征在于，所述步骤S2中透明质酸的分子量为48～780kDa。

6.根据权利要求1所述高效递送siRNA的载药纳米粒，其特征在于，所述槲皮素与Zn²⁺的络合物、siRNA和苯硼酸-透明质酸共轭物的摩尔比为20:1～2:2～4。

7.根据权利要求1所述高效递送siRNA的载药纳米粒，其特征在于，所述步骤S3中恒温孵育温度为35～40℃。

8.根据权利要求1所述高效递送siRNA的载药纳米粒，其特征在于，所述步骤S3中缓冲液为HEPES缓冲液。

9.一种如权利要求1～8任一项所述的高效递送siRNA的载药纳米粒在制备膀胱癌的基因共载药物中的应用。