[发明专利]一种外泌体ALK融合蛋白磁免疫化学发光检测试剂盒

权利要求书

1.一种外泌体ALK融合蛋白磁免疫化学发光检测试剂盒，包括：磁珠悬液、ALK蛋白抗体工作液、发光激发液、标准品、稀释液、洗涤液；所述磁珠悬液中的磁珠微球包被有外泌体CD81/CD63抗体；所述ALK蛋白抗体工作液含有吖啶酯标记的ALK蛋白抗体；所述ALK蛋白抗体为ALK蛋白胞外肽段抗体1和ALK蛋白胞内肽段抗体2的组合，其中，胞外肽段抗体1与胞内肽段抗体2的比例为1～10：1；所述胞外肽段抗体1选自ALK蛋白胞外区19-1038区间肽段的抗体；所述胞内肽段抗体2选自ALK蛋白胞内区域1060-1620区间肽段的抗体。

2.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述胞外肽段抗体1与胞内肽段抗体2的比例为4～6：1。

3.如权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于：所述胞外肽段抗体1与胞内肽段抗体2的比例为5：1。

4.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述胞外肽段抗体1选自以下其中之一的抗体，

序列如SEQ ID NO：1所示的ALK蛋白胞外区19-1038肽段的抗体；

序列如SEQ ID NO：2所示的ALK蛋白胞外区251-350肽段的抗体；

序列如SEQ ID NO：5所示的ALK蛋白胞外区19-300肽段的抗体；

序列如SEQ ID NO：6所示的ALK蛋白胞外区400-1038肽段的抗体。

5.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述胞内肽段抗体2选自以下其中之一的抗体，

序列如SEQ ID NO：3所示的ALK蛋白胞内区域1060-1620肽段的抗体；

序列如SEQ ID NO：4所示的ALK蛋白胞内区域1366-1468肽段的抗体；

序列如SEQ ID NO：7所示的ALK蛋白胞内区域1060-1400肽段的抗体；

序列如SEQ ID NO：8所示的ALK蛋白胞内区域1400-1620肽段的抗体。

6.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述磁珠悬液中含有鼠IgG抗体、多聚鼠IgG抗体、多聚兔IgG抗体、人IgG1抗体、嗜异性阻断剂HBR。

7.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述磁珠悬液含有0.4-0.6 mg/mLCD81/CD63抗体包被的磁珠微球，100-200 mg/L 鼠IgG抗体、50-70mg/L多聚鼠IgG抗体、50-70mg/L多聚兔IgG抗体、80-120 mg/L 的人IgG1抗体、50-70mg/L嗜异性阻断剂HBR、8-9 g/L氯化钠、5-7 g/L三羟甲基氨基甲烷Tris，0.04-0.06%的叠氮化钠，pH 7.2-7.8。

8.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述磁珠悬液中的磁珠微球粒径为1～3 μm，所述磁珠微球采用化学偶联剂N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐活化。

9.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述ALK蛋白抗体工作液中含有吖啶酯标记的ALK蛋白抗体的浓度为0.01-0.05 μg/mL，工作液的pH值为6.0～6.5。

10.如权利要求9所述的检测试剂盒，其特征在于：所述ALK蛋白抗体工作液的溶液体系为5-7g/L磷酸二氢钠、3-5 g/L磷酸氢二钠、6-8 g/L氯化钠、0.1-0.4g/L Pluronic® F-127、pH6.0～6.5的缓冲液。

11.如权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于：所述发光激发液包括激发液A和激发液B；所述激发液A包含0.1～0.2M HNO₃、和体积浓度0.3～0.6%的H₂O₂，溶剂为水；所述激发液B包含0.25～0.5M的NaOH，溶剂为水。