[发明专利]一种二聚型生物碱及其制备与应用

说明书

本发明涉及一种二聚型生物碱及其制备与应用，该二聚型生物碱的化学结构式如下所示：本发明所述的生物碱为苦豆子中新发现的金雀花碱型二聚型生物碱，可明显抑制Topo I的活性，有潜力成为具有高选择性的天然拓朴异构酶抑制剂，可设计开发成为新型抗肿瘤药物，在新药研发领域具有广泛应用前景。

技术领域

本发明属于生物碱技术领域，涉及一种二聚型生物碱及其制备与应用。

背景技术

一直以来，肿瘤都是困扰全球的疾病，正如国际癌症研究机构(GLOBOCAN)的统计报告所确定的那样，其发病率和死亡率居高不下。目前常见的治疗手段有化疗、放射线治疗、免疫疗法等，然而在临床中存在副作用及耐药性等问题，因此，在开发新型抗肿瘤药物时，更倾向于使用靶向不同生物靶标的小分子药物来帮助研究关于细胞增殖的内容。此外，大多数抗肿瘤药物的来源直接或间接与天然药用植物有关。

苦豆子是一种药用价值很高的植物，近十年来都有学者对其进行不断的研究。苦豆子中含有多种化合物，常见的有生物碱、类固醇化合物、类黄酮、多糖以及挥发油，在这些化学成分中，其主要生物活性成分是喹喏里西啶类生物碱。喹喏里西啶类生物碱具有多种生物活性，常见的有抗肿瘤、抗炎、抗心律失常、镇痛等。

拓扑异构酶在多种肿瘤细胞中有高水平表达，因此，抑制拓扑异构酶活性可有效抑制肿瘤细胞生长。此外，研究表明，大多数抗肿瘤药物在生物体内靶向DNA，并且直接作用于DNA，干扰其发挥正常生理作用，从而影响基因表达与调控，达到抑制或杀死肿瘤细胞的作用。因此，提供合适的拓扑异构酶抑制剂具有广泛的应用前景。

发明内容

本发明的目的就是为了提供一种二聚型生物碱及其制备与应用。

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：

本发明的技术方案之一提供了一种二聚型生物碱，其化学结构式如下所示：

本发明的技术方案之二提供了一种二聚型生物碱的制备方法，包括以下步骤：

(1)取苦豆子种子打磨成粉体，以乙醇为溶剂加热回流提取，此处可加热回流多次，且多次所得提取的浓缩滤液可以合并，得到浓缩滤液作为药液备用；

(2)取药液加水溶解调节pH呈碱性，采用氯仿萃取，静置至分层清洗，再取氯仿相反复萃取至无颜色，旋干氯仿，得到总生物碱粗品；

(3)将总生物碱粗品经硅胶柱层析分离，依次用二氯甲烷-甲醇梯度洗脱，用薄层色谱检测，得到中间馏分；

(4)将中间馏分经ODS柱层析分离，用甲醇-水梯度洗脱，得到若干洗脱部位，经薄层色谱检测，显色，即得到目标产物。

进一步的，步骤(1)中，加热回流的温度为80～90℃，时间为1～4h。

进一步的，步骤(1)中，加热回流过程中的料液比为1:8～12。

进一步的，步骤(1)中，所用乙醇溶剂为质量分数70～80％的乙醇溶液。

进一步的，步骤(1)中，加热回流的次数为一次或若干次。

进一步的，步骤(2)中，调节pH所用试剂为氢氧化钠溶液。

进一步的，步骤(2)中，pH被调节至10～11。

进一步的，步骤(2)中，氯仿与所加水的体积比为1:1；水的添加量满足药液溶解即可，即水尽量少加。

进一步的，步骤(3)中，二氯甲烷-甲醇的梯度变化范围为50:1～1:9。