[发明专利]用于提取糖化血红蛋白的磁性微球的制备方法及应用

说明书

本发明公开了一种用于提取糖化血红蛋白的磁性微球的制备方法，包括磁性颗粒的制备步骤、Fe₃O₄磁性颗粒油酸修饰步骤、用于提取糖化血红蛋白的磁性微球的制备步骤；还公开了一种应用磁性微球提取血液中糖化血红蛋白的方法，其中磁性微球由用于提取糖化血红蛋白的磁性微球的制备方法制得，包括全血样本裂解步骤、磁性微球吸附糖化血红蛋白步骤、洗脱糖化血红蛋白步骤。本发明的工艺流程简单，可操作性强，无污染，成本低廉，易于工业大批量生产，得到的磁性微球具有良好的生物相容性，提取过程操作简单，蛋白载量大，提取得到的糖化血红蛋白纯度高。

技术领域

本发明涉及提取磁性微球领域，尤其涉及一种用于提取糖化血红蛋白的磁性微球的制备方法及应用。

背景技术

目前在糖化血红蛋白中提取磁性微球的工艺流程复杂，成本昂贵，不适用于工业大批量生产，且得到的磁性微球生物相容性相对较差，蛋白载量低、提取得到的糖化血红蛋白纯度不高的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种工艺流程简单、可操作性强、无污染，成本低廉、易于工业大批量生产、得到的磁性微球具有良好的生物相容性、提取过程操作简单、蛋白载量大、提取得到的糖化血红蛋白纯度高的用于提取糖化血红蛋白的磁性微球的制备方法及其应用。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种用于提取糖化血红蛋白的磁性微球的制备方法：包括如下步骤，

S1）磁性颗粒的制备步骤

称取无水三氯化铁，聚乙二醇2000，在乙二醇中搅拌至溶解，再向其中加入三水合乙酸钠，继续搅拌，将溶解好的液体转移至水热釜中持续加热，反应结束后，冷却至室温，分别用蒸馏水和无水乙醇洗涤，真空干燥得到Fe₃O₄磁性颗粒；

S2）Fe₃O₄磁性颗粒螯合修饰步骤

向反应瓶中加入S1）步骤得到的Fe₃O₄磁性颗粒、蒸馏水，超声分散后，于水浴中快速搅拌，然后加入螯合试剂，并继续搅拌，反应结束后，冷却至室温，分别用蒸馏水和无水乙醇洗涤磁性颗粒，真空干燥得到螯合试剂修饰的Fe₃O₄磁性颗粒；

S3）用于提取糖化血红蛋白的磁性微球的制备步骤

向反应瓶中依次加入S2）步骤得到的螯合试剂修饰的Fe₃O₄磁性颗粒、表面活性剂、交联剂、功能化单体、蒸馏水，超声溶解分散后将反应瓶转至水浴中搅拌，然后向其中加入引发剂，继续搅拌，反应结束后分别用无水乙醇和蒸馏水洗涤产物，真空干燥得到用于提取糖化血红蛋白的磁性微球。

优选地，在S1）步骤中，持续加热的温度为250℃，加热时长为8h。

优选地，在S1）步骤、S2）步骤中，均用蒸馏水和无水乙醇洗涤三遍。

优选地，Fe₃O₄磁性颗粒的粒径为300 nm-800 nm。

优选地，在S1）步骤中的真空干燥的温度是60℃（±10℃），时间是6h（±2h）；在S2）步骤、S3）步骤中的真空干燥的温度是60℃（±10℃），时间是3h（±1h）。

优选地，在S2）步骤中，螯合试剂可以是：油酸、十一烯酸、丙烯酸、甲基丙烯酸中的一种或多种。

优选地，在S3）步骤中，表面活性剂可以是：十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、十六烷基三甲基溴化铵、壬基酚聚氧乙烯醚、吐温20中的一种或者多种。

优选地，在S3）步骤中，交联剂和功能化单体可以是：对二乙烯基苯、乙二醇二甲基丙烯酸酯、苯乙烯、4-乙烯基苯硼酸中的一种或多种。