[发明专利]CE-SDS方法优化及其在抗体纯度检测中的应用

权利要求书

1.一种优化的CE-SDS纯度检测方法，包括如下步骤：

1).样品处理液的配置：分别配置非还原样品处理液和还原样品处理液；所述非还原样品处理液为：20μL样品缓冲液与2μLIAM储液和1μL SDS储液混合；所述还原样品处理液为：20μL样品缓冲液与1.2μL DTT储液混合；所述IAM储液浓度为0.5M，所述SDS储液浓度为10％(w/v)，所述DTT储液浓度为1M；

2).将步骤1)所制备的样品处理液与样品混合，具体包括以下步骤：

a.将21μL非还原处理液与3μL抗体溶液混合制得非还原混合样品，

b.将21μL还原处理液与3μL抗体溶液混合制得还原混合样品；

3).加热处理步骤2)所制备的混合样品；

4).加热样品的稀释：在步骤3)加热处理过的混合样品中分别加入去离子水；

5)上样和数据分析。

2.如权利要求1所述的检测方法，其中，步骤1)中IAM、SDS和DTT储液均使用0.22μm滤膜进行过滤处理。

3.如权利要求1所述的检测方法，其中，步骤2)中所述抗体为单克隆抗体。

4.如权利要求1所述的检测方法，其中，步骤2)中所述抗体溶液浓度为1mg/ml～2mg/ml。

5.如权利要求1所述的检测方法，其中，步骤3)中:用75℃金属浴或水浴锅加热处理所述混合样品，加热处理时间为10分钟或15分钟。

6.如权利要求1所述的检测方法，其中，步骤4)中：在24μL加热处理过的混合样品中加入45μL去离子水。

7.如权利要求1-6任一项所述的检测方法，其中，试剂工作浓度为：IAM工作浓度为为38mM；SDS工作浓度为0.76％；DTT工作浓度为49mM；SDS工作浓度为0.41％。

8.如权利要求1-6任一项所述的检测方法，其中，所述抗体工作浓度为：单克隆抗体处理浓度0.125mg/ml～0.25mg/ml；单克隆抗体检测浓度为0.043mg/ml～0.086mg/ml。

9.权利要求1所述的检测方法在单克隆抗体纯度检测中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其中，所述单克隆抗体为单特异性抗体、双特异性抗体、多特异性抗体、纳米抗体和抗体融合蛋白中的一种或多种。