[发明专利]一种用于制备光学纯的6-氟-色满-2-羧酸的连续双相分批拆分工艺

说明书

本发明公开了一种用于制备光学纯的6‑氟‑色满‑2‑羧酸的连续双相分批拆分工艺，以外消旋6‑氟‑色满‑2‑羧酸甲酯为底物，进行两批次或多批次反应，相邻批次反应交替使用表达EstS的重组大肠杆菌或表达EstR的重组大肠杆菌作为催化剂；在有机相和水相的双相体系中反应；每批次反应完成后，回收有机相，纯化水相，去除溶剂，获得(S)‑6‑氟‑色满‑2‑羧酸或(R)‑6‑氟‑色满‑2‑羧酸；在每个批次后补充水相，用于下一批次反应；在每两个批次后补充底物6‑氟‑色满‑2‑羧酸甲酯，用于下一批次反应如此循环，实现6‑氟色满‑2‑羧酸甲酯的连续分批拆分。本发明的方法，具有总拆分效率高、立体选择性强、工艺相对简单等特点。

技术领域

本发明属于医药生物化工技术领域，具体地说，是关于一种用于制备光学纯的6-氟-色满-2-羧酸的连续双相分批拆分工艺。

背景技术

6-氟-色满-2-羧酸是重要医药中间体。化学名称是6-氟-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃-2-甲酸，化学分子式是C₁₀H₉O₃F分子量是196.18，结构式为：

在许多具有生物活性的分子结构中，都能发现6-氟-色满的色满结构单元的存在。譬如，该结构广泛包含在维生素E及许多拮抗β受体的抗高血压药中。光学纯的6-氟-色满-2-羧酸用于新型降血压药物(S,R,R,R)-奈必洛尔的合成。(S,R,R,R)-奈必洛尔是第三代兼有血管扩张作用的心脏高度选择性β1受体阻滞剂，主要用于治疗原发性高血压，能有效地控制高血压和保持左心室功能，并且具有剂量低、副作用少，耐受性好等优点。

杨森制药有限公司提供了一种以6-氟-色满-2-羧酸为起始原料来制备(S,R,R,R)-奈必洛尔的合成路线，合成路线如图1所示。

从奈必洛尔的合成路线图中可知，6-氟-色满-2-羧酸的拆分是第一步也是关键的一步。6-氟-色满-2-羧酸的拆分效率是影响合成奈必洛尔的关键环节。因此提高其拆分效率也是值得研究的问题。

6-氟-色满-2-羧酸是制备奈必洛尔的关键中间体，其拆分效率决定制备奈必洛尔合成方法的最终结果。但是关于6-氟-色满-2-羧酸(R)-，(S)-光学异构体拆分方法文献报道较少。迄今为止，化学方法、生物拆分法等是几种拆分有机酸常用的办法。化学拆分方法均以外消旋的6-氟色满-2-羧酸化合物为原料，通过与不同手性有机胺反应，形成非对映异构体的酰胺或铵盐，利用非对映异构体酰胺或铵盐在溶剂中的溶解度差异，经重结晶分离出R或S构型的6-氟色满-2-羧酸。但是此方法存在生产成本高，过程较冗长，拆分效率较低，环境污染严重等问题。

为此，市面上有部分利用脂肪酶或酯酶选择性水解6-氟色满-2-羧酸甲酯或乙酯，得到光学纯的(R)-6-氟-色满-2-羧酸。此类方法具有操作简便，条件温和，立体选择性高等优点。EP2646426报道过利用来源于真菌Ophiostoma novo-ulmi的酯酶拆分外消旋的6-氟-色满-2-羧酸乙酯，分离纯化得到(R)-6-氟-色满-2-羧酸，ee值是90.72％，转化率是50.28％,其中立体选择性不高。但是目前没有文献关于利用脂肪酶或酯酶拆分制备(S)-6-氟-色满-2-羧酸的报道；因此急需找到其他的高活性和高立体选择性的脂肪酶/酯酶。

发明内容