[发明专利]一种鉴定过敏原的方法在审
申请号: | 202111591696.6 | 申请日: | 2021-12-23 |
公开(公告)号: | CN114317667A | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 李振兴;吴烨婷;林洪;曹立民;黄玉浩;赵金龙;朱文烨 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;G01N15/14 |
代理公司: | 北京睿智保诚专利代理事务所(普通合伙) 11732 | 代理人: | 周新楣 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 过敏原 方法 | ||
1.一种鉴定过敏原的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)用GM-CSF和IL-4诱导骨髓细胞分化,当树突细胞比例超过90%时,得未成熟的树突细胞;
(2)用待鉴定样品刺激上述所得未成熟的树突细胞45~50h,若树突细胞的MHCⅡ和CD86表达上调6%以上,且树突细胞分泌IL-6的水平上升15%以上,分泌IFN-γ的水平上升4%以上,同时树突细胞分泌TNF-α的水平下降1%以上,则对待鉴定样品进行下一步鉴定,否则说明待鉴定样品不是过敏原;
(3)将通过上述鉴定的刺激完成的树突细胞与T细胞进行共培养,若共培养体系中IL-4的分泌水平与IFN-γ的分泌水平的比例≥0.8,则表示T细胞发生了Th2向偏移,认为待鉴定样品是过敏原,否则说明待鉴定样品不是过敏原。
2.根据权利要求1所述的一种鉴定过敏原的方法,其特征在于,所述过敏原包括食物过敏原或非食物过敏原。
3.根据权利要求1或2所述的一种鉴定过敏原的方法,其特征在于,步骤(1)中所述GM-CSF的浓度为18~22ng/mL,所述IL-4的浓度为8~12ng/mL。
4.根据权利要求3所述的一种鉴定过敏原的方法,其特征在于,步骤(2)中所述待鉴定样品的浓度为0.05~0.5mg/mL。
5.根据权利要求4所述的一种鉴定过敏原的方法,其特征在于,步骤(3)中所述树突细胞与T细胞的个数比为1:8~12,所述T细胞的表面含有CD4+分子,所述共培养的时间为45~50h。
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