[发明专利]一种溴代三苯甲基四氮唑联苯中二溴海因的检测方法

说明书

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种溴代三苯甲基四氮唑联苯中二溴海因的检测方法，本方法是通过顶空气相色谱仪配置ECD检测器的方法来控制的，为BBTT中二溴海因的检测提供了一种便捷、高效、准确的检测方法，该方法能有效检测BBTT中二溴海因的含量，从而有效保障用药安全。该方法在系统适用性、专属性、定量限和检测限、重复性、加样回收率、溶液稳定性方面完全符合中国药典方法验证的指导原则，可用于BBTT中二溴海因的质量控制。

技术领域

本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种一种溴代三苯甲基四氮唑联苯中二溴海因的检测方法。

背景技术

基因毒性杂质又称遗传毒性杂质，是指在较低水平时也有可能直接引起DNA损伤，导致DNA突变，可能致使癌症的DNA反应性物质。基因毒性杂质的控制贯穿药品研制的全生命周期，是一项复杂精细的工程。EMA、FDA和ICH相继出台了许多与基因毒性相关的指导原则。BBTT的工艺合成中可能会引入基因毒性杂质二溴海因，对BBTT中基因毒性杂质二溴海因进行有效控制，可确保用BBTT作为物料去合成的原料药中能有效控制二溴海因的含量。目前现有技术中还没有文献报道BBTT中二溴海因的检测方法，对此，我们为BBTT中的二溴海因的含量检测提供了一种便捷、高效、经济和准确的检测方法。

发明内容

本次发明首次公开了溴代三苯甲基四氮唑联苯（BBTT）中二溴海因的检测方法，本方法是通过顶空气相色谱仪配置ECD检测器的方法来控制的，为BBTT中二溴海因的检测提供了一种便捷、高效、准确的检测方法，该方法能有效检测BBTT中二溴海因的含量，从而有效保障用药安全。

一种BBTT中基因毒性杂质二溴海因的检测方法，该方法在系统适用性、专属性、定量限和检测限、重复性、加样回收率、溶液稳定性方面完全符合中国药典方法验证的指导原则，可用于BBTT中二溴海因的质量控制。

本发明公开了一种BBTT中基因毒性杂质二溴海因的检测方法，具体包括以下步骤：

a. 配制空白溶液、对照溶液、测试溶液；b. 测定：采用顶空进样装置以及ECD检测器的程序升温气相色谱方法测定BBTT中基因毒性杂质二溴海因的含量，待系统稳定后，分别进样空白溶液、对照溶液和测试溶液，记录色谱图。

进一步地，所述步骤a中所述空白溶液、对照溶液、测试溶液如下所示：

进一步地，所述步骤b中的色谱条件为6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷柱，进样口温度为150℃，ECD检测器温度为260℃，分流比为10：1，流速为2.5 mL/min。

更进一步地，所述6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷色谱柱为DB-624 30m×0.53mm，3.0μm或效能相当的色谱柱。

进一步地，所述步骤b中的色谱柱温为45℃，保持5min，以40℃/min升温至150℃，保持6min。

进一步地，所述步骤b中顶空进样条件为，平衡温度45℃，定量环温度：60℃，传输线温度：75℃，平衡时间：20min ，GC循环时间：20min，进样时间：0.5min。

测定步骤和要求：待系统稳定后，进空白溶液至少2针，对照溶液6针，测试溶液1针，序列最后进对照溶液1针，记录色谱图。连续6针对照溶液中二溴海因的峰面积的RSD≤20.0%。

式中：A_i：测试溶液中二溴海因的峰面积；A_s：6针对照溶液中二溴海因的平均峰面积；C_s：对照溶液中二溴海因的浓度，µg/mL；C_i：测试溶液的浓度，g/ml。