[发明专利]一种苏云金芽孢杆菌的液体培养基及培养方法在审
申请号: | 202111593497.9 | 申请日: | 2021-12-23 |
公开(公告)号: | CN114214239A | 公开(公告)日: | 2022-03-22 |
发明(设计)人: | 王猛;胡虓;万俊;龚永华;周莉;刘华梅 | 申请(专利权)人: | 武汉科诺生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A01N63/23;A01N25/14;A01P5/00;C12R1/07 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 程青;邹玲 |
地址: | 430074 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 苏云金 芽孢 杆菌 液体 培养基 培养 方法 | ||
1.一种液体培养基,其特征在于,所述液体培养基以水为溶剂,每1L液体培养基中添加有如下成分:
玉米淀粉30-40g,
黄豆饼粉35-45g,
玉米浆10-30g,
蛋白胨5-10g,
酵母粉5-8g,
酵母抽提物2-5g,
L-酪氨酸0.2-0.5g,
硫酸铵0.1-0.5g,
磷酸二氢钾0.3g,
硫酸镁0.03g,
硫酸锌0.03g,
硫酸锰0.02g和
氯化钙0.2g。
2.如权利要求1所述的液体培养基,其特征在于,每1L液体培养基中添加的所述黄豆饼粉的量为35、40或45g,玉米浆的量为10、20或30g,硫酸铵的量为0.1、0.3或0.5g。
3.如权利要求1所述的液体培养基,其特征在于,每1L液体培养基中添加的玉米淀粉和黄豆饼粉的总量大于等于70g。
4.如权利要求1所述的液体培养基,其特征在于,所述液体培养基中玉米淀粉、黄豆饼粉、玉米浆、蛋白胨、酵母粉、酵母抽提物、L-酪氨酸、硫酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸锌、硫酸锰和氯化钙的添加量为:每1L液体培养基中添加的所述的玉米淀粉为30g,黄豆饼粉为45g,玉米浆为30g,蛋白胨为5g,酵母粉为5g,酵母抽提物5g,酪氨酸0.3g,硫酸铵为0.3g,磷酸二氢钾为0.3g,硫酸镁0.03g,硫酸锌0.03g,硫酸锰0.02g,氯化钙为0.2g。
5.如权利要求1~4中任一项所述的液体培养基在培养苏云金芽孢杆菌中的应用。
6.如权利要求5中所述的应用,所述苏云金芽孢杆菌为苏云金芽孢杆菌HAN055,其保藏编号为CCTCC NO:M 2015608。
7.一种苏云金芽孢杆菌的培养方法,其特征在于,所述培养方法是采用如权利要求1~4中任一项所述的液体培养基对苏云金芽孢杆菌进行的摇瓶培养方法或发酵罐培养方法。
8.如权利要求7所述的培养方法,其特征在于,所述的培养方法为摇瓶培养方法,其包括如下步骤:配制发酵培养基,调节初始pH为7.0,按三角瓶有效容积的1/5分装培养基,121℃高压蒸汽灭菌30min;采用LB培养基培养12h、菌体数量108cfu/mL培养液作为种子,接种量为3%;30℃、300r/min振荡培养,发酵时间为28~36h。
9.如权利要求7所述的培养方法,其特征在于,所述的培养方法为发酵罐培养方法,其包括如下步骤:按发酵罐60%的装料系数配制培养基,调节初始pH为7.0,121℃高压蒸汽灭菌30min;采用LB培养基培养12h,菌体数量108cfu/mL培养液作为种子,接种量为3%;在发酵的0-4h,控制搅拌转速300r/min,通气比1:0.8;在发酵的4-16h,控制搅拌转速600r/min,通气比1:1.2;在发酵的16-36h,控制搅拌转速300r/min,通气比1:0.8,期间维持罐压0.05-0.06Mpa,培养温度为30℃,发酵时间为28~36h。
10.一种制备苏云金芽孢杆菌WP制剂的方法,其特征在于,所述的苏云金芽孢杆菌WP制剂是采用权利要求7或8所述的培养方法制得的发酵液制备而得,发酵液经过滤离心处理后收集菌浆,添加助剂分散均匀后进行喷雾干燥,制得苏云金芽孢杆菌WP制剂。
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