[发明专利]有机肥中大环内酯类抗生素的检测方法及其样品处理方法

说明书

本发明公开了一种有机肥中大环内酯类抗生素的检测方法及其样品处理方法。所述样品处理方法包括：采用由硫酸锰、硫酸锌、硫代乙酰胺、乙二醇、异丙醇和四氧化三铁合成得到的Fe₃O₄@ZnOMnO粉末作为吸附材料，在pH＝4.0‑7.0缓冲溶液中对有机肥进行磁性固相萃取吸附，经氨水乙腈洗脱液解吸，解吸后的洗脱液经吹干得到处理后样品。所述有机肥中大环内酯类抗生素的检测方法，采用所述样品处理方法得到的处理后样品作为测试样品，直接采用现有大环内酯类抗生素的检测方法中的一种或者多种进行检测。本发明操作简便、省时快速、吸附材料可重复利用且检测结果准确，能够广泛的推广应用。

技术领域

本发明涉及抗生素的检测技术领域，具体涉及一种有机肥中大环内酯类抗生素的检测方法及其样品处理方法。

背景技术

有机肥，主要来源于植物和(或)动物，施于土壤以提供植物营养为其主要功能的含碳物料。经生物物质、动植物废弃物、植物残体中加工而来。动物饲料中添加人工合成的抗生素会残留在粪便中，粪便加工后抗生素会残留在有机肥中，研究表明，与未使用有机肥的土壤相比，长期施用粪便有机肥的部分土壤四环素类和大环内酯类抗生素含量会提高十倍到几十倍。有机肥中抗生素在土壤中积累，对作物生长有一定影响，还会向水体扩散，引起地表水和地下水污染，目前抗生素对土壤健康的影响和危害已经受到人们的关注，因此有机肥中抗生素残留的问题不容忽视。

大环内酯类抗生素(macrolides antibiotics，MA)是一类分子结构中具有12-16碳内酯环的抗菌药物的总称，通过阻断50s核糖体中肽酰转移酶的活性来抑制细菌蛋白质合成，属于快速抑菌剂。主要用于治疗需氧革兰阳性球菌和阴性球菌、某些厌氧菌以及军团菌、支原体、衣原体等感染。研究表明大环内酯类抗生素除了抗菌作用外,还具有其他广泛的药理作用。常用的药物有红霉素(Erythromycln，EM/ERY)、克拉红霉素(Clarithromycin，CAM)、罗红霉素(Rokitamycin，RM/ROX)和阿奇霉素(Azithromycin，AZM)。

目前大环内酯类抗生素的检测方法主要有配合常规检测器例如光电二极管阵列检测器(DAD)或者紫外检测器的高效液相色谱法(HPLC)和高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS/LC-MS)检测法，针对不同的样品和检测目标一般会采用适用的样品处理方法，以降低样品中其它物质对检测目标的检测结果的干扰。有机肥中大环内酯类抗生素的前处理方法即样品处理方法主要是固相萃取法，例如葛峰等人建立了有机肥样品中磺胺类、氟喹诺酮类、四环素类和大环内酯类共18种抗生素残留的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱检测方法(葛峰,郭坤,谭丽超,等.有机肥中4类典型兽药抗生素的多残留测定[J].生态与农村环境学报,2012,028(005):587-594.)；有机肥样品用乙二胺四乙酸二钠-乙腈(1:1,V/V)的混合液提取，亲水/亲油平衡(HLB)固相萃取柱萃取净化，高效液相色谱-串联质谱-电喷雾正离子多反应监测方式(MRM)进行测定。吴丹等人采用超高效液相色谱串联质谱法测定有机肥中15种抗生素的残留(吴丹,高敏,孙艳梅,等.超高效液相色谱串联质谱法测定有机肥中15种抗生素残留[C].2017中国环境科学学会科学与技术年会论文集(第三卷).中国环境科学学会,2017.)；样品采用乙腈-Na₂EDTA-McIlvaine缓冲溶液(1:1，V/V)超声提取，经固相萃取柱净化，外标法定量；测定时用Thermo HyspersilGOLD C18色谱柱(100mm×2.1mm，3μm)分离，以选择反应监测(SRM)进行定性定量分析。由于有机肥中成分复杂，使用传统吸附材料的固相萃取柱进行萃取，在净化过程中固相萃取柱容易堵塞，降低样品质量达不到检出限标准；且固相萃取柱存在化合物丢失严重、检测结果重复性差、费时费力且成本较高的技术问题。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明提供了一种操作简便且检测结果准确的有机肥中大环内酯类抗生素的检测方法及其样品处理方法。

一种有机肥中大环内酯类抗生素检测的样品处理方法，包括步骤：