[发明专利]一种特定结构褐藻寡糖的制备方法及其在诱导水稻抗病方面的应用

权利要求书

1.一种特定结构褐藻寡糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将新鲜海带酶解，制备褐藻酸钠；

(2)取制备的褐藻酸钠粉末，用褐藻胶裂解酶再次酶解，制备褐藻寡糖；

(3)配置褐藻寡糖溶液，通过不同乙醇洗脱，分别进行活性检测，挑选活性最好的洗脱组，制得特定结构褐藻寡糖。

2.根据权利要求1所述的一种特定结构褐藻寡糖的制备方法，其特征在于，在步骤中(1)，将新鲜海带酶解，制备褐藻酸钠的方法为：

取新鲜海带，将新鲜海带冲洗4-5次，晾干后用粉碎机粉碎，制得海带粉末；向海带粉末中加入水混合均匀，然后加入纤维素酶酶解，获得第一酶解液；向第一酶解液内加入果胶酶酶解，获得第二酶解液；将第二酶解液加热沸腾10min，在8000-11000rpm条件下离心30min，取上清液，向上清液内加入2％的氯化钙，沉淀后获得褐藻酸钙沉淀；将褐藻酸钙加入次氯酸钠漂白后，在加入盐酸酸化，干燥后粉碎，获得褐藻酸钠粉末。

3.根据权利要求2所述的一种特定结构褐藻寡糖的制备方法，其特征在于，所述纤维素酶的添加量为2％。

4.根据权利要求2所述的一种特定结构褐藻寡糖的制备方法，其特征在于，所述酶解的温度为45℃，酶解时间为20min。

5.根据权利要求2所述的一种特定结构褐藻寡糖的制备方法，其特征在于，所述果胶酶的添加量为1％。

6.根据权利要求2所述的一种特定结构褐藻寡糖的制备方法，其特征在于，所述果胶酶的酶解温度为55℃，酶解时间为30min。

7.根据权利要求1所述的一种特定结构褐藻寡糖的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，取制备的褐藻酸钠粉末，用褐藻胶裂解酶再次酶解，制备褐藻寡糖的方法为：

取褐藻酸钠粉末，通过氢氧化钠调节PH值为6.5，加入1.2％的褐藻胶裂解酶，在温度为45℃的条件下，400-600rpm水浴恒温振荡反应；用18000rpm的管式离心机离心，取上清液，利用孔径为4000道尔顿的陶瓷膜超滤，将膜系统截留的酶解液直接喷雾干燥，得到为褐藻寡糖；铝箔袋分装后，置于Co-60辐射灭菌装置灭菌3h，即得褐藻寡糖成品。

8.根据权利要求1所述的一种特定结构褐藻寡糖的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，配置褐藻寡糖溶液后，还通过大孔吸附树脂进行吸附。

9.根据权利要求1所述的一种特定结构褐藻寡糖的制备方法，其特征在于，在步骤(3)中，用脯氨酸羟化酶进行活性检测。

10.权利要求1-9任意一项所述制备方法制备的特定结构褐藻寡糖在诱导水稻抗病方面的应用。