[发明专利]一种特定结构褐藻寡糖的制备方法及其在诱导水稻抗病方面的应用

说明书

本发明涉及水稻种植技术领域，具体涉及一种特定结构褐藻寡糖的制备方法及其在诱导水稻抗病方面的应用；包括以下步骤：(1)将新鲜海带酶解，制备褐藻酸钠，(2)用褐藻胶裂解酶再次酶解，制备褐藻寡糖，(3)配置褐藻寡糖溶液，通过不同乙醇洗脱，分别进行活性检测，挑选活性最好的洗脱组，制得特定结构褐藻寡糖；本发明通过新鲜海带粉碎的粉末，将海带粉末进而两次酶解，第一次用纤维素酶，第二次用果胶酶，再通沉淀、漂白、酸化以及干燥粉碎，制得褐藻酸钠粉末，将褐藻酸钠粉末再次酶解、离心，制得褐藻寡糖，通过乙醇洗涤，挑选出具有特定结构褐藻寡糖，该褐藻寡糖配置成诱导剂后，能够诱导水稻抗恶苗病。

技术领域

本发明涉及水稻种植技术领域，具体涉及一种特定结构褐藻寡糖的制备方法及其在诱导水稻抗病方面的应用。

背景技术

稻通称水稻，是禾本科一年生水生草本。秆直立，高0.5-1.5 米，随品种而异。叶鞘无毛、松弛；叶舌披针形；叶片线状披针形，宽约1厘米，无毛，粗糙。圆锥花序大型疏展，棱粗糙；小穗含1成熟花；颖极小，仅在小穗柄先端留下半月形的痕迹，锥刺状；两侧孕性花外稃质厚，具5脉，中脉成脊，表面有方格状小乳状突起，厚纸质，遍布细毛端毛较密，有芒或无芒。稻是亚洲热带广泛种植的重要谷物，中国南方为主要产稻区，北方各省均有栽种。

专利申请号为CN201710848659.6的“一种野菊花的种植方法”的专利，其在说明书中记载有“具体包括以下步骤：选地、整地、栽植、田间管理、病虫害防治；本发明通过整地、施基肥、田间管理及病虫害防治一系列方法对野菊花进行种植，使土壤疏松，腐殖质丰富，排水良好，培育出的菊花植株抗病性强，同时培育出的菊花植株抗病性强，香味浓郁，有利于大面积推广野菊花种植”，上述专利所提供的方法，虽然能够实现野菊实现一定的抗病效果，但是其耗费人工成本，而且难以从根本上改变野菊的抗病属性，无法满足种植人员的需求。

综上所述，研发一种特定结构褐藻寡糖的制备方法及其在诱导水稻抗病方面的应用，仍是水稻种植技术领域中急需解决的关键问题。

发明内容

针对现有技术所存在的上述缺点，本发明的目的在于提供一种特定结构褐藻寡糖的制备方法及其在诱导水稻抗病方面的应用，本发明通过新鲜海带粉碎的粉末，将海带粉末进而两次酶解，再通沉淀、漂白、酸化以及干燥粉碎，制得褐藻酸钠粉末，将褐藻酸钠粉末再次酶解、离心，制得褐藻寡糖，通过乙醇洗涤，挑选出具有特定结构褐藻寡糖，该褐藻寡糖配置成诱导剂后，能够诱导水稻抗恶苗病。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

一种特定结构褐藻寡糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)将新鲜海带酶解，制备褐藻酸钠；

(2)取制备的褐藻酸钠粉末，用褐藻胶裂解酶再次酶解，制备褐藻寡糖；

(3)配置褐藻寡糖溶液，通过不同乙醇洗脱，分别进行活性检测，挑选活性最好的洗脱组，制得特定结构褐藻寡糖。

本发明进一步设置为：在步骤中(1)，将新鲜海带酶解，制备褐藻酸钠的方法为：

取新鲜海带，将新鲜海带冲洗4-5次，晾干后用粉碎机粉碎，制得海带粉末；向海带粉末中加入水混合均匀，然后加入纤维素酶酶解，获得第一酶解液；向第一酶解液内加入果胶酶酶解，获得第二酶解液；将第二酶解液加热沸腾10min，在8000-11000rpm条件下离心30min，取上清液，向上清液内加入2％的氯化钙，沉淀后获得褐藻酸钙沉淀；将褐藻酸钙加入次氯酸钠漂白后，在加入盐酸酸化，干燥后粉碎，获得褐藻酸钠粉末。

本发明进一步设置为：所述纤维素酶的添加量为2％。

本发明进一步设置为：所述酶解的温度为45℃，酶解时间为 20min。

本发明进一步设置为：所述果胶酶的添加量为1％。