[发明专利]一种用于林可链霉基因工程菌的种子培养基及培养发酵生产林可霉素的方法

权利要求书

1.一种用于林可链霉基因工程菌的种子培养基，其特征在于：按质量浓度，原料包括：玉米浆30～40g/L、黄豆饼粉10～15g/L、淀粉15～25g/L、葡萄糖5～15g/L、硫酸铵1～3g/L、碳酸钙3～5g/L，水余量。

2.如权利要求1所述的用于林可链霉基因工程菌的种子培养基，其特征在于，各原料的质量浓度为：玉米浆36.357g/L、黄豆饼粉13.441g/L、淀粉20g/L、葡萄糖10g/L、硫酸铵1.5g/L、碳酸钙4g/L，水余量。

3.如权利要求1或2所述的种子培养基在林可链霉基因工程菌培养发酵生产林可霉素中的应用。

4.一种通过林可链霉基因工程菌培养发酵生产林可霉素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将林可链霉基因工程菌在斜面培养基上于30℃温度条件下培养7d，然后将培养得到的孢子接种于如权利要求1或2所述的种子培养基中，于30℃温度条件下振荡培养48h，然后转接至发酵培养基中进行培养发酵。

5.如权利要求4所述的通过林可链霉基因工程菌培养发酵生产林可霉素的方法，其特征在于，所述斜面培养基，按质量浓度，原料包括：可溶性淀粉20g/L、黄豆饼粉5g/L、氯化钠0.5g/L、硝酸钾1g/L、七水硫酸亚铁0.01g/L、七水硫酸镁1.02g/L、三水磷酸氢二钾0.66g/L、琼脂18g/L、水余量。

6.如权利要求4所述的通过林可链霉基因工程菌培养发酵生产林可霉素的方法，其特征在于，所述发酵培养基，按质量浓度，原料包括：葡萄糖100g/L、黄豆饼粉20g/L、玉米浆1.5g/L、硝酸钠8g/L、氯化钠5g/L、硫酸铵6g/L、磷酸氢二钾0.3g/L，水余量；

定容后用5mol/L的NaOH溶液调节pH至7.45-7.5，混匀后加入8g/L碳酸钙。

7.一种通过林可链霉基因工程菌培养发酵生产林可霉素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将林可链霉基因工程菌在斜面培养基上于30℃温度条件下培养7d，然后将培养得到的孢子接种于如权利要求1或2所述的种子培养基中，于30℃温度条件下转动培养48h，然后将培养得到的一级种子转接至二级种子培养基中，于30℃温度条件下培养至培养基pH达6.8以上，之后接种至含有罐培培养基的发酵罐内进行培养发酵。

8.如权利要求7所述的通过林可链霉基因工程菌培养发酵生产林可霉素的方法，其特征在于，所述二级种子培养基，按质量浓度，原料包括：淀粉4g/L、黄豆饼粉10g/L、玉米浆15g/L、葡萄糖28g/L、硫酸铵2.5g/L、氯化钠6g/L、磷酸二氢钾0.3g/L，水余量；

定容后用5mol/L的NaOH溶液调节pH至7.2，混匀后加入10g/L碳酸钙。

9.如权利要求7所述的通过林可链霉基因工程菌培养发酵生产林可霉素的方法，其特征在于，所述罐培培养基，按质量浓度，原料包括：淀粉4.5g/L、黄豆饼粉15.4g/L、玉米浆15.4g/L、葡萄糖17.5g/L、硫酸铵4.3g/L、氯化钠8.5g/L、磷酸二氢钾0.3g/L、硝酸铵4.3g/L、硝酸钠4.8g/L、水余量；

定容后用5mol/L的NaOH溶液调节pH至7.45-7.5，混匀后加入7.7g/L碳酸钙，1g/L泡敌。