[发明专利]一种全固相合成醋酸亮丙瑞林的方法

说明书

本发明提供一种全固相合成醋酸亮丙瑞林的方法，包括：（1）氨基树脂与乙醛反应，经还原胺化得到乙基取代的氨基树脂；（2）采用Fmoc/tBu固相法依次偶联后续保护氨基酸，合成得到侧链全保护的亮丙瑞林肽树脂；（3）采用TFA混合溶液对侧链全保护的亮丙瑞林肽树脂进行切割得到亮丙瑞林粗肽；（4）对亮丙瑞林粗肽进行HPLC纯化，转盐，浓缩，冻干，得到醋酸亮丙瑞林。本发明全部在固相完成，操作简单，非常适合多肽的工业化生产。

技术领域

本发明涉及制药技术领域，特别涉及一种全固相合成醋酸亮丙瑞林的方法。

背景技术

醋酸亮丙瑞林为一种多肽原料药，制剂名称为醋酸亮丙瑞林。醋酸亮丙瑞林的适应症为子宫内膜异位症；伴有月经过多、下腹痛、腰痛及贫血等的子宫肌瘤；绝经前乳腺癌，且雌激素受体阳性患者；前列腺癌；中枢性性早熟。

醋酸亮丙瑞林是日本武田化工最早发现，并发明其合成工艺，其作为促黄体激素释放激素的九肽酰胺类似物，具有很好的活性。先后在日本、德国、美国等国家申请专利，专利号分别为JP19740027442、DE2446005、US4008209等。

中国专利CN 106146622 A以PAM树脂为原料，采用Boc和Fmoc法相结合合成， Boc合成前四肽，Fmoc法合成后五肽，液相中乙胺胺解树脂，之后浓缩干溶剂再用切割液切割得粗肽。该方法需要用大量TFA多次脱Boc保护基，危险性很大，最后用乙胺胺解树脂，乙胺常温下接近气体，乙胺的取用非常危险，不利于人员安全及生产操作。

中国专利CN 101195653 B以CTC树脂为原料固相合成八肽树脂，以N-叔丁氧羰基-脯氨酸为原料合成N-叔丁氧羰基-脯氨酸乙胺盐酸盐，脱除树脂得到全保护八肽粗肽，采用液相法连接两个片段。该法需要液相合成N-叔丁氧羰基-脯氨酸乙胺盐酸盐，且最终两个片段的连接需要在溶液相完成，对工人操作要求高，无法推广。

目前已公布的醋酸亮丙瑞林合成工艺都有着一定的缺陷，几乎都需要固液相结合才能够实现醋酸亮丙瑞林的合成，对生产操作要求高，不能有效发挥固相多肽合成的优势。

发明内容

本发明的目的是提供一种全固相合成醋酸亮丙瑞林的方法，有利于醋酸亮丙瑞林的全固相工业化合成，解决现有技术的缺陷。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种全固相合成醋酸亮丙瑞林的方法，其包括以下步骤：

(1)氨基树脂与乙醛反应，经还原胺化得到乙基取代的氨基树脂；

(2)采用Fmoc/tBu固相法依次偶联后续保护氨基酸，合成得到侧链全保护的亮丙瑞林肽树脂；

(3)采用TFA混合溶液对侧链全保护的亮丙瑞林肽树脂进行切割得到亮丙瑞林粗肽；

(4)对亮丙瑞林粗肽进行HPLC纯化，转盐，浓缩，冻干，得到醋酸亮丙瑞林原料药。

醋酸亮丙瑞林是一条碳端乙胺化的肽酰胺，目前并没有固相载体树脂能够直接合成得到肽酰乙胺，各专利和文献的做法一般都是通过王树脂或CTC树脂得到肽酸，再与乙胺反应构建酰胺键，这步反应需要在液相中进行，操作上更加繁琐，且乙胺沸点低，操作非常危险。

本发明人通过采用氨基树脂与乙醛进行还原胺化反应得到乙基取代的氨基树脂，该树脂含仲胺基，能够继续与保护氨基酸的羧基反应依次构建酰胺键，实现合成亮丙瑞林肽树脂的目的。本发明能够实现全固相合成醋酸亮丙瑞林，这也是本发明的技术亮点。

本发明中氨基树脂为常规固相载体中含氨基基团的树脂，市场上容易购买，一般有 AM树脂，MBHA树脂，Rink amide AM树脂，Rink amide MBHA树脂，siber树脂等。