[发明专利]一种纯化TPO的工艺及方法有效
| 申请号： | 202111596915.X | 申请日： | 2021-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN114196643B | 公开（公告）日： | 2022-10-28 |
| 发明（设计）人： | 冯奇;林晏因;李乾;付鹏德;蒋雪;姬成东 | 申请（专利权）人： | 中元汇吉生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/08 | 分类号： | C12N9/08;C12N15/53;C12N15/866 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 400037 重庆市大渡口区*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 纯化 tpo 工艺 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种生产高纯度TPO的方法，包括，
(1)重组TPO基因转入细菌细胞制备质粒；
(2)步骤(1)中制备的质粒转染到Sf9细胞中，制作TPO病毒；
(3)将TPO病毒导入H .five细胞中进行表达，得TPO蛋白；
(4)筛选纯化TPO抗体；
(5)将纯化后的TPO抗体与填料按一定条件混合，制成亲和层析柱；
(6)在步骤(5)中制备的亲和层析柱中加入步骤(3)中的TPO蛋白，利用洗脱液对亲和层析柱进行洗脱，纯化TPO蛋白；
所述步骤(6)中的洗脱液，包含1-5M的金属离子盐，pH＝6 .5-8 .0；
所述重组TPO基因不含有任何标签；
所述金属离子盐选自NaCl、LiCl或MgCl2。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(6)中的洗脱液所述金属离子盐的浓度为2-4 M，pH＝6 .8-7 .3。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述TPO抗体与填料按一定条件混合为TPO抗体：填料＝10：1。
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