[发明专利]与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记及应用有效
申请号: | 202111602477.3 | 申请日: | 2021-12-24 |
公开(公告)号: | CN114032333B | 公开(公告)日: | 2023-07-18 |
发明(设计)人: | 汤继华;陈晓阳;连玉杰;陈永强 | 申请(专利权)人: | 河南农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 郑州豫原知识产权代理事务所(普通合伙) 41176 | 代理人: | 吴小传 |
地址: | 450002 河南省*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 玉米 高温 敏感 基因 lsht1 紧密 连锁 分子 标记 应用 | ||
1.与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记,其特征在于,所述分子标记包括分子标记D65和分子标记C29,二者物理距离为550Kb,所述玉米高温敏感基因lsht1位于玉米第2染色体上的分子标记D65和分子标记C29之间;所述分子标记D65的核苷酸序列如SEQ IDNO.21或SEQ ID NO.22所示,所述分子标记C29的核苷酸序列如SEQ ID NO.23或SEQ IDNO.24所示;
扩增所述分子标记D65的引物D65-F的序列如SEQ ID NO.11,D65-R的序列如SEQ IDNO.12所示;
扩增所述分子标记C29的引物C29-F的序列如SEQ ID NO.15,C29-R的序列如SEQ IDNO.16所示。
2.如权利要求1所述的与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记,其特征在于,所述分子标记D65位于玉米第2染色体,具体位置chr2:11047183-11047457,参考基因组版本号为Zm-B73-REFERENCE-NAM-5.0。
3.如权利要求1所述的与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记,其特征在于,所述分子标记C29位于玉米第2染色体,具体位置chr2:11390961-11391156,参考基因组版本号为Zm-B73-REFERENCE-NAM-5.0。
4.用于鉴别权利要求1所述的分子标记D65的引物,其特征在于,所述引物为D65-F和D65-R,所述D65-F的序列如SEQ ID NO.11所示,D65-R的序列如SEQ ID NO.12所示。
5.如权利要求4所述的用于鉴别分子标记D65的引物在玉米耐高温种质资源鉴定中的应用,其特征在于,所述分子标记D65在高温敏感突变体中的扩增序列大小为275bp,扩增序列如SEQ ID NO.22所示,所述分子标记D65在野生型中的扩增序列大小为297bp,扩增序列如SEQ ID NO.21所示。
6.用于鉴别权利要求1所述的分子标记C29的引物,其特征在于,所述引物为C29-F和C29-R,所述C29-F的序列如SEQ ID NO.15,C29-R的序列如SEQ ID NO.16所示。
7.如权利要求6所述的用于鉴别分子标记C29的引物在玉米耐高温种质资源鉴定中的应用,其特征在于,所述分子标记C29在高温敏感突变体中的扩增序列大小为196bp,扩增序列如SEQ ID NO.24所示,所述分子标记C29在野生型中的扩增序列大小为203bp,扩增序列如SEQ ID NO.23所示。
8.权利要求1所述的与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记在玉米耐高温种质资源鉴定中的应用。
9.如权利要求8所述的与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记在玉米耐高温种质资源鉴定中的应用,其特征在于,玉米耐高温种质资源鉴定过程为:提取玉米叶片基因组DNA,以玉米叶片基因组DNA为模板,利用所述引物D65-F/D65-R进行PCR扩增;
当检测出所述分子标记D65大小为297bp时,则表示待检样品为耐高温玉米种质,当检测出所述分子标记D65大小为275bp时,则表示待检样品为不耐高温玉米种质。
10.如权利要求8所述的与玉米高温敏感基因lsht1紧密连锁的分子标记在玉米耐高温种质资源鉴定中的应用,其特征在于,玉米耐高温种质资源鉴定过程为:提取玉米叶片基因组DNA,以玉米叶片基因组DNA为模板,利用所述引物C29-F/C29-R进行PCR扩增;
当检测出所述分子标记C29大小为203bp时,则表示待检样品为耐高温玉米种质,当检测出所述分子标记C29大小为196bp时,则表示待检样品为不耐高温玉米种质。
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