[发明专利]黄芩原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法

说明书

本发明公开了黄芩原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法，涉及药材检验技术领域。本发明以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，包括以下洗脱步骤：步骤S1：梯度洗脱时长0‑2min，取流动相A占比2％，流动相B占比98％；步骤S2：梯度洗脱时长2‑5min，取流动相A占比2‑17％，流动相B占比98‑83％；步骤S3：梯度洗脱时长5‑10min，取流动相A占比17‑25％，流动相B占比83‑75％；步骤S4：梯度洗脱时长10‑20min，取流动相A占比25％，流动相B占比75％；步骤S5：梯度洗脱时长20‑25min，取流动相A占比25‑45％，流动相B占比75‑55％等。本发明高效液相色谱检验方法弥补了目前没有黄芩原药材及饮片特征图谱检验方法的空缺。

技术领域

本发明涉及药材检验技术领域，特别是涉及黄芩原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法。

背景技术

黄芩别名山茶根、土金茶根，是唇形科黄芩属多年生草本植物，黄芩是中国的传统中药材，具有清热燥湿，泻火解毒，止血，安胎的作用，临床应用广泛，用量极大；

目前黄芩原药材及饮片检验标准为《中国药典》2020版一部，暂无特征图谱检验方法，黄芩原药材及饮片检测时保留时间不稳定，锋面积不稳定，锋状态、主峰等一系列色谱条件不稳定；因此，我们提出黄芩原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法。

发明内容

本发明的目的在于提供黄芩原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法，通过设计出保留时间稳定，锋面积稳定，锋状态、主峰等一系列色谱条件稳定的可施行的特征图谱的检验方法，以解决上述背景中提出的问题。

为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明为黄芩原药材及饮片特征图谱的高效液相色谱检验方法，所述色谱条件与系统适用性试验包括以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B，包括以下洗脱步骤：

步骤S1：梯度洗脱时长0-2min，取流动相A占比2％，流动相B占比98％；

步骤S2：梯度洗脱时长2-5min，取流动相A占比2-17％，流动相B占比98-83％；

步骤S3：梯度洗脱时长5-10min，取流动相A占比17-25％，流动相B占比83-75％；

步骤S4：梯度洗脱时长10-20min，取流动相A占比25％，流动相B占比75％；

步骤S5：梯度洗脱时长20-25min，取流动相A占比25-45％，流动相B占比75-55％；

步骤S6：梯度洗脱时长25-29min，取流动相A占比45-50％，流动相B占比55-50％；

步骤S7：梯度洗脱时长29-32min，取流动相A占比50-70％，流动相B占比50-30％；

步骤S8：梯度洗脱时长32-33min，取流动相A占比70-2％，流动相B占比30-98％。

优选地，所述步骤S1-步骤S8中，洗脱流速1.0ml/min，检测波长280nm，柱温30℃，理论板数按黄芩苷计算不低于5000。

优选地，所述检验方法包括参照物溶液制备，所述参照物溶液制备方法，包括如下步骤：

步骤1，取黄芩对照药材0.1g，置具塞锥形瓶中，加入70％甲醇25ml，密塞，超声处理20分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液；

步骤2，另取黄芩苷对照品、黄芩素对照品、汉黄芩素对照品，分别加甲醇制成每1ml含黄芩苷60μg、黄芩素20μg、汉黄芩素10μg的溶液，作为对照品参照物溶液。