[发明专利]一种用于果蔬样品中农药残留的快速检测方法

说明书

本发明公开了一种用于果蔬样品农药残留现场快速检测方法，首先提取工具酶并对工具酶进行固定化、装柱，然后对水果蔬菜中的农药进行检测，检测完先用缓冲溶液处理，再用碱酸碱处理，以实现对使用后的酶柱进行载体回收。本发明采用的检测工具酶成本低廉、易于标准化提取，节约成本，采用的参比柱为同种失活酶，用于食品中农药的实测，排除了色素干扰，提高检测精密度，检测结果的绝对差值不超过算术平均值的，阳性结果的符合率达到，样品处理时间一分钟，检测时间为分钟，适合多次定期使用，为农药残留现场快速检测提供了技术支持。

技术领域

本发明涉及农药检测领域，特别涉及一种用于果蔬样品中农药残留的快速检测方法。

背景技术

随着农业产业化的发展，农产品的生产越来越依赖于农药、抗生素和激素等外源物质。农药残留超标，影响消费者食用安全，严重时会造成消费者致病、发育不正常，甚至直接导致中毒死亡。为了保障食品安全，严格监督食品中的农药残留，最为有效的方法之一是加强对食品中农药残留检测的力度。

果蔬中农药残留超标的情况一直存在，究其原因：一是农户不按规定的用药量、次数、方法或安全间隔期施药，或施用不允许在果蔬上使用的剧毒、高度农药；二是现有标准施行的农药残留测定需要用大型分析仪器对有机溶剂进行提取、净化，无法对廉价的果蔬进行快速检测而导致监管不到位。而传统的农药残留分析方法需要昂贵的仪器设备和专业技术人才，并且受到场地的限制。随着农药残留快速检测技术的出现，这些技术限制被打破。酶抑制率法在果蔬的农药残留快速检测中得到广泛应用，乙酰胆碱酯酶是酶抑制率法的重要组成部分。在国标GB/T 5009.199-2003的酶抑制率法中讲述了乙酰胆碱酯酶显色反应的原理，通过测定乙酰胆碱酯酶被抑制的程度来判断农药残留是否超标。商品化的乙酰胆碱酯酶酶制剂价格昂贵，而且由于检测时是在体外进行抑制，部分农药对乙酰胆碱酯酶的抑制并不明显，需要附加氧化助剂或预处理，以提高对农药检测的灵敏度。

现有的农药残留的现场检测方法存在缺陷，主要是现有方法使用的工具酶价格高昂，使用后无法回收，导致检测成本过高，影响多次定期发布。

发明内容

为克服现有技术中存在的不足，本发明提供了一种用于果蔬样品中农药残留的快速检测方法。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明首先公开了一种用于果蔬样品中农药残留的快速检测方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)提取工具酶；所述工具酶为从蚯蚓血清和鸭血血清中提取的粗酶液的混合物；

(2)对工具酶进行固定；

(3)将工具酶装柱；

(4)对果蔬样品农药残留进行检测。

优选的，所述工具酶由蚯蚓血清粗酶提取液和鸭血血清粗酶液按照1：2的体积比例混合而成。

优选的，所述的蚯蚓血清粗酶液的提取方法如下：

(A1)将蚯蚓洗净后放入清水中12-24h，排净其体内粪便；

(A2)向蚯蚓中加入磷酸缓冲液并制成匀浆液，离心后弃去上清液，得到粗酶提取液；其中每g蚯蚓加入的磷酸缓冲液的体积为1mL；

(A3)步骤(A2)所得的粗酶提取液，再加入表面活性剂Triton X-114和缓冲溶液，并用无菌水稀释至体积为粗酶提取液的10倍；

(A4)离心，分层后将上层溶液倾倒出去，下层溶液即为蚯蚓血清粗酶提取液。

优选的，所述步骤(A3)中，表面活性剂Triton X-114、缓冲溶液相对于步骤(A2)所得的粗酶提取液的加入量为粗酶提取液体积的一半，表面活性剂Triton X-114与缓冲溶液的体积比为1:2-1:3。