[发明专利]一种重组人成纤维细胞生长因子-9蛋白药物冻干制剂及其应用

说明书

一种重组人成纤维细胞生长因子‑9蛋白药物冻干制剂及其应用。本发明提供了一种冻干重组人FGF‑9蛋白药物制剂，能够有效保护蛋白的稳定性并治疗肝损伤，尤其是能够修复和保护急性肝损伤。具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，更为具体的，本发明涉及一种重组人成纤维细胞生长因子-9蛋白药物冻干制剂及其应用。

背景技术

急性肝损伤主要是短期内由多种原因包括病毒感染、药物滥用、食物中毒、酒精摄入过量以及放射线损伤等引起的肝功能突发性异常疾病，是包括肝硬化、肝癌等肝脏疾病的始动因素，临床发病呈逐年增加趋势。但目前临床尚缺乏能够有效刺激肝功能，保护和修复受损肝细胞的治疗性手段和药物，使肝病成为全球死亡率最高的疾病。

成纤维细胞生长因子(Fibroblast growth factor,FGF)信号在调节多种细胞功能包括细胞增殖、存活、分化和迁移中发挥着重要的作用。FGF-9作为成纤维细胞生长因子家族成员之一，最初发现于人类神经胶质瘤细胞系，作为胶质细胞激活因子(Glia-activating factor,GAF)以自分泌或旁分泌的方式促进胶质细胞和神经元的分化和存活，并在许多生理过程中起至关重要的作用。文献报道，FGF-9在胚胎发育、组织修复、骨骼发育、神经再生、毛发再生等方面扮演着重要的角色，是一具有多种生物学功能细胞因子(Pierre M et al.Developmental Biology,2006,293(1):77-89；Zhenlong Zheng etal.Sep-Oct,2014,22(5):660-665；YU Liyun et al.Chinese Medical Journa,2007,120(6):491-495；Takashi Kanda et al.Brain Research,2000,876(1-2):22-30；Denise Gayet al.Nat Med,2013,19(7):916-923.)。

前期发明人的研究表明，FGF-9在正常人肝细胞的氧化损伤模型中具有良好的抗凋亡和保护作用。另外在小鼠急性肝损伤模型中给予FGF-9，可显著减弱氧化损伤和炎症反应，从而降低小鼠的死亡率。其作用机制与目前认为的急性肝损伤主要作用机制kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)-核因子E2相关蛋白(Nrf2)调节及阻断NF-κB的核转位，从而抑制其下游调控的促炎症细胞因子表达水平的通路相符。

然而FGF-9氨基酸序列中含有大量碱性氨基酸(赖氨酸、精氨酸等)，大量负电荷的氨基酸集聚、相互排斥，导致肽键不稳定易断裂。因此很难将其制备为生物药剂使用。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供一种可行的人FGF-9蛋白冻干制剂，使其在冻干和长期储存过程中能够对人FGF9蛋白起到良好的保护作用。为了实现上述技术效果，本发明提供如下的技术方案：

本发明的第一方面，提供一种重组人成纤维细胞生长因子-9蛋白药物冻干制剂，所述制剂的活性成分为成纤维细胞生长因子9(FGF-9)蛋白，优选的，所述FGF-9为去除N端信号肽的人天然FGF-9。

在一种实施方案中，所述重组人成纤维细胞生长因子-9蛋白药物冻干制剂包括药用辅料，所述药用辅料在制剂中起赋形剂、保护剂、抗氧化剂的作用。优选的，所述赋形剂为多元醇或糖类或二者的复合；所述蛋白保护剂为糖类或聚合物或二者的复合。最为优选的，所述重组人成纤维细胞生长因子-9蛋白药物冻干制剂每支包括如下组分：1～10mg重组人FGF-9蛋白、10～100mg甘露醇/10～100mg蔗糖、10～100mg海藻糖/5～50mg聚乙二醇、0.1～1mg组氨酸/1～10mg精氨酸/1～10mg谷氨酸钠及10～50mM柠檬酸盐缓冲体系，制剂的pH范围为5.0～6.6。

本发明的第二方面，提供一种重组人成纤维细胞生长因子-9蛋白药物冻干制剂的应用，更为具体的，所述应用为将所述冻干制剂制备为用于治疗肝损伤的药物中的应用，优选的，所述应用为将所述冻干制剂制备为用于保护和修复急性肝脏损伤的药物中的应用。