[发明专利]一种快速鉴别牛痘病毒的引物、探针及试剂盒

权利要求书

1.一种快速鉴别牛痘病毒的引物、探针，所述的引物包括上游引物和下游引物，其特征在于：所述的上游引物的序列为5’-ACGCCAACAACGGACCACAT-3’，或与其具有至少80％同源性的序列；

所述的下游引物的序列为5’-TAGTCGCGATGCTGCTGACG-3’，或与其具有至少80％同源性的序列；

所述的探针的序列为5’-GCGTTTGGATCTGCGCCGTG-3’，或与其具有至少80％同源性的序列。

2.根据权利要求1所述的快速鉴别牛痘病毒的引物、探针，其特征在于，所述的引物扩增片段大小为180～185bp。

3.根据权利要求1所述的快速鉴别牛痘病毒的引物、探针，其特征在于，所述的上游引物的长度、所述的下游引物的长度和所述的探针的长度独立地为18～22bp。

4.根据权利要求1所述的快速鉴别牛痘病毒的引物、探针，其特征在于，所述的上游引物的GC含量为50～60％；所述的下游引物的GC含量为55～65％；所述的探针的GC含量为60～70％。

5.根据权利要求1所述的快速鉴别牛痘病毒的引物、探针，其特征在于，所述的探针的5’端连接有荧光报告基团，所述的探针的3’连接有荧光淬灭基团。

6.根据权利要求5所述的快速鉴别牛痘病毒的引物、探针，其特征在于，所述的荧光报告基团为FAM；所述的荧光淬灭基团为TAMRA或BHQ。

7.一种快速鉴别牛痘病毒的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括权利要求1至6中任一项所述的引物、探针。

8.根据权利要求7所述的快速鉴别牛痘病毒的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括DNA标准品，所述的DNA标准品的序列为ACGCCAACAACGGACCACATCCTTCTTCATCAACCGAGTTGTTAATCTTGGCTCCATACTGTACCAATAAATTTATTCTCTCTATGACTTCATCATCTGTTCCCGAGAGATAATATAGAGGTGTTTTATTATGTTTATCACACGCGTTTGGATCTGCGCCGTGCGTCAGCAGCATCGCGACTA。

9.一种如权利要求1至6中任一项所述的引物、探针和/或如权利要求7或8所述的试剂盒在检测生物制品中牛痘病毒中的应用。

10.一种快速鉴别牛痘病毒的方法，其特征在于，所述的方法为以待检测生物制品中的DNA为模板，采用引物、探针进行荧光定量PCR反应，采集荧光信号以确定所述的待检测生物制品中的牛痘病毒的含量，所述的引物、探针为权利要求5所述的引物、探针。